全3件 ( 1 〜 3 )　 前 | 次 　1/ 1. /1

(無題) 削除/引用 No.2881-3 - 2010/07/17 (土) 21:34:15 - 名無し 生体試料についてはキットやそのもとになる論文に書いてあると思うので参照されるのが良いと思います。測定対象とする物質もさまざまで、それぞれ性質はことなると思うのでこうした方がいいと一概には言えません。ただ不安定なものが多いと思うので、出来るだけ早く測定するにこした事はないと思います。 同じものを測定するキットでも方法が違うと試料の保存上の注意点や前処理とかも違う事があるし、実験目的や試料の性質や実験の都合からみて何を測るのがいいかまず決めて、次に使用するキットの説明書をたよりに個別に見るしかないです。書いてない事は、学術などに直接問い合わせてみるとよいです。 組織切片で酸化ストレスを評価する場合、多くは酸化ストレスによる核酸や蛋白質の修飾体（酸化ストレスが起きた痕跡）をそれらに対する特異抗体で検出する方法がよく行われています。検出する対象に応じて抗体やキットはいろいろあります(たとえば8-OHdGとかHNE付加体などよく見ます）。通常の免疫組織染色と同様に固定など標本作成の条件は抗体や対象となる修飾体により異なりますから、何をみるかで違ってくるので一概にこうした方がいいということはいえないです。販売元のサイトから説明書を参照するなどしてみるとよいでしょう。標本作成について必要な情報は書いてあると思います。

(無題) 削除/引用 No.2881-2 - 2010/07/14 (水) 20:29:05 - himawari 尿/血清サンプル----- -80℃で半永久的に保存できます。 分注したものを使い切りにすれば大丈夫です。 凍結融解したサンプルは酸化ストレスの系において推奨できません。 ELISA kitの中には血清や尿サンプルをフィルター濾過する場合がありますので、サンプルの分注は100uL以上がよいと思います。 酸化ストレスマーカーはELISAだとだいたい50〜100uLの希釈していないサンプルが必要なはずです。 組織----- こちらは新鮮凍結組織をストックしておきます。 組織をあらかじめ適当に切っておいて、液体窒素で凍結後、-80℃で保存しておきます。 尿/血清と同じく凍結融解の繰り返しはダメなので小分けしておきます。 ホルマリン固定----- 酸化ストレスマーカーを免疫染色でみることができるので、原理的には可能だと思いますが、私は経験がありません。 固定時間が長かったり、固定が強すぎると発色等に影響が出そうなのは容易に想像がつきますが、どうでしょうか。 （免疫染色でも同じですね）

組織における酸化ストレスの測定 削除/引用 No.2881-1 - 2010/07/14 (水) 12:41:22 - J 今回初めてマウスの肺における酸化ストレスを測定したいと考えております。さまざまな市販のキットをみてみると、サンプルとして尿、血清、組織などがでてきます。 サンプルの条件について、下記の点についてお聞きしたいです。 ・キットによっても違うと思いますが、一般的に尿、血清などのサンプルは凍結保存をしてどのぐらいの期間、酸化ストレスの評価を行えるのでしょうか。 ・組織検体をサンプルとして使う場合、やはり生組織を使うということなのでしょうか。新鮮凍結組織を使用して組織中の酸化ストレスを評価された方がおられますでしょうか？やはり、ホルマリン固定をしてしまった組織では、酸化ストレスを評価することは難しいでしょうか。 初歩的な質問で大変恐縮ですが、ご教授願います。

全3件 ( 1 〜 3 )　 前 | 次 　1/ 1. /1

パスワードを入力してチェックした記事を

チェックした記事を

---