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アグロバクテリウム形質転換 トピック削除
No.2794-TOPIC - 2010/06/29 (火) 08:49:02 - Fire
アグロバクテリウムにプラスミドを形質転換しようと思ってます。
しかしながら、プラスミド及びアグロバクテリウムがカナマイシン耐性であって、
形質転換されたなかったものまで増えてくると思うんですが、
何かいい解決策はあるでしょうか?
 
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(無題) 削除/引用
No.2794-7 - 2010/06/30 (水) 22:53:47 - ストリゴ脂質
プラスミドにHPTがあるならハイグロで選抜。
なければEHA101を105に変える。

(無題) 削除/引用
No.2794-6 - 2010/06/30 (水) 08:28:46 - take_
専門家に聞こう!
http://www.brc.riken.jp/lab/epd/

Tiの事? 削除/引用
No.2794-5 - 2010/06/29 (火) 16:06:55 - K
アグロに導入されているTiプラスミドのことでしょうか...?
Tiと導入ベクターが共にカナマイシン耐性ということですかね?

自分はある系統(一般的なアグロ)の1を辞めて5にして、クロラムフェニコール耐性を使っています。容易に手に入ると思いますが、回答になってますでしょうか???

(無題) 削除/引用
No.2794-4 - 2010/06/29 (火) 14:40:55 - 昼休み
理屈上は、カナマイシン耐性のプラスミド?を脱落させたアグロバクテリウムをコロニーレプリカ選抜などで得て(cureする)、別のカナマイシン選抜プラスミドを入れることは可能です。でも、現状のカナマイシン耐性プラスミドを除いても良いか、後々困ることはないか、よく考えてから実行して下さい。(多分困るはずです)

(無題) 削除/引用
No.2794-3 - 2010/06/29 (火) 11:36:59 - Fire
あまりよくわかっていないので質問させてもらったんですけど、
いただいたアグロはカナマイシン耐性を持っていたということは、
すでに何らかのプラスミドが入っていたと考えられるのでしょうか。
もしその場合、目的の遺伝子の入ったプラスミドだけを入れるには何か方法はあるのでしょうか?

(無題) 削除/引用
No.2794-2 - 2010/06/29 (火) 10:58:18 - ザンギ
アグロの野生株に薬剤耐性はないですよね?
2つプラスミドを持たせたいということですか?

アグロバクテリウム形質転換 削除/引用
No.2794-1 - 2010/06/29 (火) 08:49:02 - Fire
アグロバクテリウムにプラスミドを形質転換しようと思ってます。
しかしながら、プラスミド及びアグロバクテリウムがカナマイシン耐性であって、
形質転換されたなかったものまで増えてくると思うんですが、
何かいい解決策はあるでしょうか?

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