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(無題) 削除/引用 No.2786-8 - 2010/06/27 (日) 21:24:36 - AP >[Re:6] g-ajさんは書きました : > 100pM/ul > =100uM/l > > 0.2uM/100uM x 35ul=0.07ul 混乱を招くといけないので訂正させてもらいます。 100 pmol/uL = 100 umol/L = 100 uM SI単位系で、M (molar)は補助単位として使用を認めるが、正規にはmol/Lを使用するように、という感じになっていたと思います。

(無題) 削除/引用 No.2786-7 - 2010/06/27 (日) 21:11:13 - AP 100 pmol/uL = 100 uMは、一般的にプライマーのストック溶液として保存するときの濃度です。濃度を薄くすると分解や吸着ロスを起こしやすいし、体積が増えてマイクロチューブ一本に収まらないからです。 その濃度ではPCR反応を仕掛けるのには濃すぎて使いにくいので、当座使用する分（短期間で使い切れるくらい）だけ、使いやすい濃度、たとえば10 uMに希釈したものをworking solutionにします。 10 uM（= 10 pmol/uL、単位が違うと混乱するのでまず単位をそろえましょう）を0.2 uMにするには50倍希釈です。つまり終体積35 uLの1/50体積、35 uL * 1/50 = 0.7 uLの10 uMプライマーを加えればいいです。 0.7 uLは微量すぎて正確に計れないと思うので、精密に濃度をあわせたいならworking solutionの濃度をもっと低くするといいでしょう。

(無題) 削除/引用 No.2786-6 - 2010/06/27 (日) 16:16:43 - g-aj 100pM/ul =100uM/l 0.2uM/100uM x 35ul=0.07ul

(無題) 削除/引用 No.2786-5 - 2010/06/27 (日) 14:23:39 - サム プライマーを1/200希釈するということですよね？？ ということは、0.175μｌ加えればよいのですか？？ 何か計算式のようなものがあると理解の手助けになるのですが…

(無題) 削除/引用 No.2786-4 - 2010/06/27 (日) 14:04:26 - GoGo いえ1/200希釈すればいいだけですよ。

>APさん 削除/引用 No.2786-3 - 2010/06/27 (日) 13:05:51 - サム １００pmol/ulでした… ということは、、２μｌ加える？で良いのでしょうか…

(無題) 削除/引用 No.2786-2 - 2010/06/27 (日) 11:47:45 - AP >現在使用しているプライマーの濃度は１００ｐＭです。 それを使用し、Final conc を０．２μＭに、Final volumeは３５μｌに調製したいです。 100 pM=0.0001 uM (uはmicroの代わりです）ですから、終濃度0.2 uMより低く希釈で濃度をあわせることはできませんが。 ひょっとして、100 pMは100 pmol/uLとか100 uMの間違いでは？

プライマーの濃度計算 削除/引用 No.2786-1 - 2010/06/27 (日) 11:18:36 - サム 間抜けな質問で申し訳ありません。 プライマーの濃度計算で混乱しています。 現在使用しているプライマーの濃度は１００ｐＭです。 それを使用し、Final conc を０．２μＭに、Final volumeは３５μｌに調製したいです。 単純に２μｌ加えれば良いのでしょうか。 宜しくお願いします。

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