>一応プロトコール通りに実験を行っています。
その「プロトコール」は、LS180細胞の為にどなたか最適化されたものでしょうか?
もし導入試薬に添付されているプロトコールの事ならば、
もれなく「試薬とsiRNAの比率は、細胞によって最適値が異なるので、必ず条件検討して下さい」と書かれているはずですが・・・
LS180細胞への導入に関しては、どなたか経験豊富な方がいらっしゃればいいのですが、
その前に過去の論文を調べて、LS180細胞にはどの試薬が良いかの検索ぐらいはされているでしょうか?
siRNAの使用期限については、
凍結融解を避けて、適切に保存されたのもならば、(1年くらいは)特に問題になったことはありません。
(1年以上のものは、私はデータを持ってません。)
あとは、RNAを回収する時間でしょうか。
24〜72時間で最大の効果と、よく幅を持って言われるのは、細胞によってピークの時間が異なるという事です。 |
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