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ウエスタンのgelについて トピック削除
No.275-TOPIC - 2009/04/04 (土) 01:28:43 - lipid
WBのgelを作ったのですが,泳動後ガラスを外したらgel(separating)がネバネバした状態でガラスに張り付いてしまい失敗しました.
separating gelをつくり,注入した際は固まったのを確認しました.

新しいラボに移って初めてのWBだったのですがアクリルアミド,APS,SDS,TEMEDに関しては特に古いものではなく問題なさそうです.
このようなご経験をされた方がいらっしゃいましたらアドバイスをお願いします.
 
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ありがとうございました. 解決済み 削除/引用
No.275-6 - 2009/04/09 (木) 00:00:31 - lipid
ご指摘のようにBisが入っていませんでした.基本的なミスでした.
お返事いただいた皆様に感謝しております.

(無題) 削除/引用
No.275-5 - 2009/04/05 (日) 03:25:04 - お
Bisアクリルアミドを入れ忘れてませんか。
以前、Bisアクリルアミド溶液のストックを作ったつもりが間違えてアクリルアミド溶液を作っており,その時に作ったゲルがネバネバでした。

(無題) 削除/引用
No.275-4 - 2009/04/05 (日) 00:06:38 - カチョー
新品のガラス板を使ったときにそうなったことがあります。なので、新品を使う時は一度スポンジと少量の洗剤で洗ってから使っています。

(無題) 削除/引用
No.275-3 - 2009/04/04 (土) 16:42:52 - あべちゃん
何回作りましたか?

何回作っても同じというのであれば、ゲルの濃度は何%ですか?
分離ゲルということなのであり得ませんが、3−3.5%程度のスタックゲルはガラス板にくっつくこともあります。
でも、それもガラス板をきれいに洗って使わなかったのが原因だと思います。

新しいラボということなので、ストック用アクリルアミドの組成など確認した方が良いと思います。T%やC%が色々ありますから、重合速度もまちまちでしょうし。

(無題) 削除/引用
No.275-2 - 2009/04/04 (土) 02:53:04 - 名無し
ゲル濃度が低くすぎたり、ゲルの重合が不完全なときにそのようになります。アクリルアミドの濃度を再確認して、完全に重合するまで置いて見て下さい。

ウエスタンのgelについて 削除/引用
No.275-1 - 2009/04/04 (土) 01:28:43 - lipid
WBのgelを作ったのですが,泳動後ガラスを外したらgel(separating)がネバネバした状態でガラスに張り付いてしまい失敗しました.
separating gelをつくり,注入した際は固まったのを確認しました.

新しいラボに移って初めてのWBだったのですがアクリルアミド,APS,SDS,TEMEDに関しては特に古いものではなく問題なさそうです.
このようなご経験をされた方がいらっしゃいましたらアドバイスをお願いします.

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