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(無題) 削除/引用 No.2690-4 - 2010/06/08 (火) 18:28:52 - kana こう@免疫屋さん、DCさん、ご返答ありがとうございます。 今は悲しいことに希釈なし(つまり上清そのまま)でも検出できない状態です。 まずは、こう@免疫屋さんアドバイスのように培養時間を48,72時間と延長してみます。

(無題) 削除/引用 No.2690-3 - 2010/06/08 (火) 13:12:41 - DC ないとは思いますが、ELISAの際に培養上清を希釈しすぎているなんて事ないですよね・・・？

(無題) 削除/引用 No.2690-2 - 2010/06/07 (月) 21:56:57 - こう＠免疫屋 培養時間を延長してみてはいかがでしょうか？

骨髄由来マクロファージのTNF産生 削除/引用 No.2690-1 - 2010/06/05 (土) 20:54:04 - kana いつも参考にさせて頂いています。 マクロファージについて研究を始めたばかりの者です。 マウスの骨髄細胞をマクロファージに分化させて、LPSなどの刺激によって分泌されるTNFをELISAで測定しようとしています。 96wellプレートに播いたマクロファージをLPS(1000, 100, 10ng/ml)で刺激してみましたが、24時間後に回収した細胞上清からTNFは検出されませんでした。recombinant TNFは測定できたので、ELISA自体は行えていると思います。また、同じ細胞上清からIL-6は検出できたので、LPSにも問題はないような気がします。 LPSはInvivogen社のものを、ELISAはBDのOptEIAシリーズのものを使用しています。 IFN-gammma(300units/ml)も加えてみましたが、やはりTNFは検出できませんでした。 どなたか経験の有る方、情報を頂ければ幸いです。

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