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EIAサンプル希釈について トピック削除
No.2684-TOPIC - 2010/06/04 (金) 15:46:04 - Oxt
ラットの血液中のオキシトシン濃度を測定しています。

用いているキットはassay designsのoxytocin enzyme immunoassay kit、
血清をC18 Seq-Pak columnを用いて抽出しています。

抽出操作の最後に減圧乾燥し、キットに付属のバッファーにとかします。
よって抽出に使用するもともとのサンプル量と、このバッファーの液量で任意の希釈率に設定できます。

測定に適切な希釈率を求めるため、1倍・3倍・10倍・30倍にそれぞれサンプルを希釈し、測定してみたところ、
1倍希釈→濃すぎてレンジ外
3・10・30倍希釈→薄すぎてレンジ外
になってしまいました。(n=2)

しかしこのキットで用いるスタンダードサンプルは、
15.6-1000 pg/ml
の範囲に及ぶため、この測定結果はどこかが間違っているのだと思います。

検証するにしても、操作上の留意点やこの結果を説明しうる考えが思いつかないので、本実験に手が出せない状況です。
この結果に対し、どのような説が考えられるのでしょうか?

つたない文章で申し訳ありませんが、ご教授よろしくお願いします。
 
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EIAサンプル希釈について 削除/引用
No.2684-1 - 2010/06/04 (金) 15:46:04 - Oxt
ラットの血液中のオキシトシン濃度を測定しています。

用いているキットはassay designsのoxytocin enzyme immunoassay kit、
血清をC18 Seq-Pak columnを用いて抽出しています。

抽出操作の最後に減圧乾燥し、キットに付属のバッファーにとかします。
よって抽出に使用するもともとのサンプル量と、このバッファーの液量で任意の希釈率に設定できます。

測定に適切な希釈率を求めるため、1倍・3倍・10倍・30倍にそれぞれサンプルを希釈し、測定してみたところ、
1倍希釈→濃すぎてレンジ外
3・10・30倍希釈→薄すぎてレンジ外
になってしまいました。(n=2)

しかしこのキットで用いるスタンダードサンプルは、
15.6-1000 pg/ml
の範囲に及ぶため、この測定結果はどこかが間違っているのだと思います。

検証するにしても、操作上の留意点やこの結果を説明しうる考えが思いつかないので、本実験に手が出せない状況です。
この結果に対し、どのような説が考えられるのでしょうか?

つたない文章で申し訳ありませんが、ご教授よろしくお願いします。

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