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PBMCの単離 トピック削除
No.2671-TOPIC - 2010/06/02 (水) 19:54:22 - ume
PBMCの単離について、伺いたいことがございます。

ficollで分離、PBSで洗浄後、沈殿を見たら、一部、赤くなっていました。
これは赤血球が混じっているのでしょうか?

しかし、その沈殿を培地に懸濁し、顕微鏡で確認したのですが、赤血球らし物は認められませんでした(この点については、染色等はしていませんので、あくまで、私の主観です)。

ご教授頂ければ幸いです。
 
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(無題) 削除/引用
No.2671-3 - 2010/06/02 (水) 23:30:25 - ami
> (この点については、染色等はしていませんので、あくまで、私の主観です)。

ここをちゃんと詰めればちゃんと解決するんじゃないですか。塗末スライドを染色するとか、FACSで確認するとか。

普通に考えれば赤血球のコンタミでしょうが。

(無題) 削除/引用
No.2671-2 - 2010/06/02 (水) 20:08:58 - うーん
>ficollで分離、PBSで洗浄後、沈殿を見たら、一部、赤くなっていました。
>これは赤血球が混じっているのでしょうか?

>ご教授頂ければ幸いです。


昔(といってもひと月前?)同じようなトピックがあったなあと思い出してレスした次第です。

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No.2432-1 - 2010/04/20 (火) 11:21:35 - かみさん
素人なもので、基本的な質問ですが、

B16メラノーマ細胞は継代しているだけでメラニンを作りますか?
(10%FBSのイーグルMEM培地です)

遠心をかけるとペレットが黒いのですが。。。
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ご教授を求めるのならご自身のficollを使った分離の詳細をまず第一に書くべきでは?
普通に考えれば赤血球のコンタミでしょうが。

PBMCの単離 削除/引用
No.2671-1 - 2010/06/02 (水) 19:54:22 - ume
PBMCの単離について、伺いたいことがございます。

ficollで分離、PBSで洗浄後、沈殿を見たら、一部、赤くなっていました。
これは赤血球が混じっているのでしょうか?

しかし、その沈殿を培地に懸濁し、顕微鏡で確認したのですが、赤血球らし物は認められませんでした(この点については、染色等はしていませんので、あくまで、私の主観です)。

ご教授頂ければ幸いです。

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