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核 FRET トピック削除
No.2640-TOPIC - 2010/05/27 (木) 15:42:20 - 核 FRET
すみません。研究初心者です
核を染色し、蛍光標識した細胞質内のたんぱく質と
FRETを起こしたいです
このような場合、どのような蛍光材料がありますでしょうか?
論文検索するにもキーワードが悪いのか
それとも見つけていても理解できていないのか・・・

参考になる情報があれば、ご教授いただければと思います
よろしくお願いします
 
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(無題) 削除/引用
No.2640-4 - 2010/05/28 (金) 16:00:11 - masa
御回答ありがとうございます。

ベックマンのhttp://www.bc-cytometry.com/FCM/sikisohyou-chart.htmで作成されている蛍光色素や蛍光タンパク質の励起波長と蛍光波長の一覧で見ると、
蛍光波長と励起波長が重複する組み合わせは見つかりそうですね。

ただhoechstやDAPIで染色した細胞にEGFPと融合させた転写因子等を発現させて核での局在を観察するような実験は良くやられているので、そのような組み合わせで容易にFRETが起きているかはちょっと疑問ですね。

私もあまり詳しくはないので蛍光関係にお詳しい方がおりましたら一緒ご教授願いたいです。

(無題) 削除/引用
No.2640-3 - 2010/05/27 (木) 22:34:46 - 核 FRET
ご返答ありがとうございます
DAPIあるいはHechstでDNAを染色し、
DNAと細胞内のたんぱく質との相互作用をFRETで見れるか
試してみたいのです

私は化学屋でして生物に関して疎いので
馬鹿なことを言っているかもしれません

(無題) 削除/引用
No.2640-2 - 2010/05/27 (木) 22:28:01 - masa
核と目的タンパク質のFRETというのがいまいちイメージ出来ないのですがDNAを蛍光染色してその励起エネルギーで蛍光標識のタンパク質を光らせたいということでしょうか?

FRETはかなり分子間の距離が近くないと起きない現象だと思います。核は特定の物質ではなくいろいろな構成分子からなる構造体なので核内の何を標識の対象にしたいのでしょうか?

それとも蛍光タンパク質を融合させたタンパク質を細胞に発現させ、DNA等の染色像と重ねて核内への局在を観察するという意味でしょうか?

核 FRET 削除/引用
No.2640-1 - 2010/05/27 (木) 15:42:20 - 核 FRET
すみません。研究初心者です
核を染色し、蛍光標識した細胞質内のたんぱく質と
FRETを起こしたいです
このような場合、どのような蛍光材料がありますでしょうか?
論文検索するにもキーワードが悪いのか
それとも見つけていても理解できていないのか・・・

参考になる情報があれば、ご教授いただければと思います
よろしくお願いします

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