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ヒト細胞へのmRNAの導入 トピック削除
No.2638-TOPIC - 2010/05/27 (木) 13:59:32 - とし
生体細胞は初心者なので知識が乏しいとは思いますが、よろしくお願いします。


現在ヒト由来の細胞(HeLa、HepG2など)に蛍光を発するタンパク(GFP,ルシフェラーゼなど)のmRNAを導入する実験を計画しています。

研究としてはそのmRNAのキャリアーを開発する事です。


そこで、ヒト由来の細胞で発現出来るようなmRNAを探しているのですが、直接買うのは委託しか無理でしょうか?


また、いくつかの文献によると自分達でDNAから作っている事が多いです。


そこで以下の製品でキャップ構造を持つmRNAを生成しようと思うのですがどうでしょうか?
テンプレートDNAはin vitroようのDNAを買ってくるつもりです。


http://www.arb-ls.com/products/mscript_mrna_production_system/


すこし長くなりましたが、よろしくお願いします。
 
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(無題) 削除/引用
No.2638-2 - 2010/05/27 (木) 18:01:03 - in situ
mRNA導入の実験はin vitro合成か、細胞から精製してくるかだと思いますが、精製は手間がかかる上に、特定のmRNAのみをとってくるのはほぼ不可能なので最近はin vitro合成したものを導入することが多いと思います。

挙げておられるキットに関しては使用したことがないのですが、一応ページを見る限り問題なさそうに思います。

RNA合成で有名なのはプロメガとかAmbionですので、そちらの方も一応チェックされるとよいかもしれません。
ARB-LS社に関しては面白い製品をいくつかだしており、使ってみようと思ったことはあるのですが、自分は実績面でプロメガかAmbionを選んでしまっています。
ここら辺の選択は教官と相談すると良いと思います。

ヒト細胞へのmRNAの導入 削除/引用
No.2638-1 - 2010/05/27 (木) 13:59:32 - とし
生体細胞は初心者なので知識が乏しいとは思いますが、よろしくお願いします。


現在ヒト由来の細胞(HeLa、HepG2など)に蛍光を発するタンパク(GFP,ルシフェラーゼなど)のmRNAを導入する実験を計画しています。

研究としてはそのmRNAのキャリアーを開発する事です。


そこで、ヒト由来の細胞で発現出来るようなmRNAを探しているのですが、直接買うのは委託しか無理でしょうか?


また、いくつかの文献によると自分達でDNAから作っている事が多いです。


そこで以下の製品でキャップ構造を持つmRNAを生成しようと思うのですがどうでしょうか?
テンプレートDNAはin vitroようのDNAを買ってくるつもりです。


http://www.arb-ls.com/products/mscript_mrna_production_system/


すこし長くなりましたが、よろしくお願いします。

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