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昆虫の外骨格がついたままのサンプルを切片化 トピック削除
No.2607-TOPIC - 2010/05/21 (金) 19:07:41 - ゴキブリ
昆虫の組織を外骨格ごと切片化したいのですが、良い方法はないでしょうか?
サンプルはゴキブリで脚や頭部になります。だいたい1-2mm3程度のサンプルです。

マウスなどの切片化法を真似してパラフィン、凍結法を試してみましたが、上手く切れません。
マウス胚の切片化は前の職場でよくやっていたので一般的な方法や手技は身に付いていると思います。
失敗する現象としては、パラフィンの場合、切片は切れても中のサンプルが外骨格から剥がれ落ちてしまいます。凍結の場合は、組織がスカスカになってしまいます。

恐らく、問題はパラフィンや固定液が浸透していないせいかと考えています。

昆虫組織の切片作製を行ったことのある方などご意見頂けたら幸いです。
 
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(無題) 削除/引用
No.2607-2 - 2010/05/26 (水) 09:36:54 - ゴキブリ使い
パラフィンの浸透が悪いのだと思いますが、硬さの違うものを一緒に切るのはなかなか難しいことです。切片の厚さを変えてみるという方法があります。50ミクロンぐらいにすればなんとかなるのではないでしょうか?
薄いのか必要なら、パラフィンからプラスチックを変えたほうが現実的だと思います。

昆虫の外骨格がついたままのサンプルを切片化 削除/引用
No.2607-1 - 2010/05/21 (金) 19:07:41 - ゴキブリ
昆虫の組織を外骨格ごと切片化したいのですが、良い方法はないでしょうか?
サンプルはゴキブリで脚や頭部になります。だいたい1-2mm3程度のサンプルです。

マウスなどの切片化法を真似してパラフィン、凍結法を試してみましたが、上手く切れません。
マウス胚の切片化は前の職場でよくやっていたので一般的な方法や手技は身に付いていると思います。
失敗する現象としては、パラフィンの場合、切片は切れても中のサンプルが外骨格から剥がれ落ちてしまいます。凍結の場合は、組織がスカスカになってしまいます。

恐らく、問題はパラフィンや固定液が浸透していないせいかと考えています。

昆虫組織の切片作製を行ったことのある方などご意見頂けたら幸いです。

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