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MOLT-4細胞 コロニー
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No.2598-TOPIC - 2010/05/20 (木) 11:37:14 -
masayosi
今MOLT-4細胞(浮遊細胞)のコロニー練習してるが、30mmのdishに細胞を100、150,200個播いたがコロニーが2-7個しかない。100,150播いたのが200播いたよりちょっと多い。播いた細胞が多いほどコロニーが多くなるのでもない気がする。何でコロニーがうまく出てないのか?どうすればいいのか教えてもらいたいです。
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No.2598-6 - 2010/05/21 (金) 09:19:28 - ~
>その人は100個に30個ぐらいあるが、私には2-7しかない。
これは、プロトコルには問題はなく、貴方のどこかの操作に問題があることを示唆するでしょう。
プロトコルに書ききれない微妙な部分もありますので、
プロトコルではなくその人の操作を見てやり方を学ぶのがいいでしょう。
(無題)
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No.2598-5 - 2010/05/20 (木) 20:06:48 -
masayosi
寒天培地で作りました。
研究室にできた人のprotocolをまねて操作したが、コロニーが出ない。
その人は100個に30個ぐらいあるが、私には2-7しかない。
(無題)
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No.2598-4 - 2010/05/20 (木) 13:37:14 - ~
>[Re:3] みさんは書きました :
> MOLT-4ってコロニー(細胞集塊)を形成しますか?
あれ?軟寒天培地での話ですよね?
Plating efficiencyは悪くない細胞だと思いますけど。
確かに全く実験操作に書かれていませんが、
まさか液体培地にそのまま撒いてコロニーを見ようとしているわけではありませんよね。
(無題)
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No.2598-3 - 2010/05/20 (木) 13:07:39 - み
MOLT-4ってコロニー(細胞集塊)を形成しますか?
かなりバラバラの状態で分裂すると思いますが。
細胞数カウントの際の細胞懸濁液の作成など基本操作は安定しているのでしょうか?
(無題)
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No.2598-2 - 2010/05/20 (木) 12:11:18 - ~
培地が熱で失活したのでは?
湿度に問題があるのでは?
希釈系列がうまくできていないのでは?
この中で、コントロールを置いて問題が無いことを確認できている点はありますか?
無ければ、うまくコロニーが出来ない理由の候補の1つになるでしょう。
>どうすればいいのか教えてもらいたいです。
出来る人から直接教わるのがいいです。
ラボ内に出来る人がいなければ、他のラボや大学に教わりに行くのもいいでしょう。
MOLT-4細胞 コロニー
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No.2598-1 - 2010/05/20 (木) 11:37:14 -
masayosi
今MOLT-4細胞(浮遊細胞)のコロニー練習してるが、30mmのdishに細胞を100、150,200個播いたがコロニーが2-7個しかない。100,150播いたのが200播いたよりちょっと多い。播いた細胞が多いほどコロニーが多くなるのでもない気がする。何でコロニーがうまく出てないのか?どうすればいいのか教えてもらいたいです。
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