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PCR
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No.2471-TOPIC - 2010/04/27 (火) 16:03:55 - うめさん
素朴な質問です。
PCRで(PCR初心者です)FwプライマーのみでPCRをおこなうと、どうなりますか?
アンチセンス鎖だけが増幅されると思うのですが、アガロースゲルで確認できるだけのDNA量が得られるのでしょうか?
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No.2471-6 - 2010/04/27 (火) 19:06:01 -
TS
というか、PCRではありませんよ。
PCR: Polymerase chain reaction
(無題)
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No.2471-5 - 2010/04/27 (火) 18:42:45 - ザンギ
回答ではありませんが
PCRは対数増殖(?)なので効率よく増えるんです。
30サイクルだと
2の30乗≒10の9乗=10億倍
です。
片側だけだと鋳型の量が一定なので、30サイクルでも
30倍にしかなりませんね。
(無題)
削除/引用
No.2471-4 - 2010/04/27 (火) 18:21:59 - らい
んで、一本鎖DNAをどうやって染める予定ですか?
(無題)
削除/引用
No.2471-3 - 2010/04/27 (火) 18:14:56 - ~
>どうなりますか?
テンプレートやプライマーや条件によって結果が変わると思います。
>アガロースゲルで確認できるだけのDNA量が得られるのでしょうか?
アンチセンス鎖のみが増幅すると仮定して、
テンプレートとプライマーの量がどれくらい使うかを貴方が決めて、
各サイクルごとにテンプレートの100%にプライマーが結合して伸長反応が起こるとして、
ある特定の長さのDNAフラグメントが何ngできるのかを考えて見ましょう。
何ngできるかは、DNAフラグメントの長さと、核酸の分子量から計算できますよね。
(無題)
削除/引用
No.2471-2 - 2010/04/27 (火) 16:25:57 - ああああ
そんなことは、聞くよりも自分で確かめた方が早いと思います。
やってみてください。
PCR
削除/引用
No.2471-1 - 2010/04/27 (火) 16:03:55 - うめさん
素朴な質問です。
PCRで(PCR初心者です)FwプライマーのみでPCRをおこなうと、どうなりますか?
アンチセンス鎖だけが増幅されると思うのですが、アガロースゲルで確認できるだけのDNA量が得られるのでしょうか?
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