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(無題) 削除/引用 No.2438-2 - 2010/04/21 (水) 22:13:42 - qq Cell Dissociation Bufferで回収した細胞を、TX100 in PBS＋MgCaで可溶化する分には核膜が残りそうですが、TX100＋EDTA／citrateでは、核膜溶解を促進しそうですね。

Cell Dissociation Bufferで回収した細胞 削除/引用 No.2438-1 - 2010/04/21 (水) 08:30:50 - あ HeLaをラージスケールで培養し、Cell Dissociation Buffer(PBS-based, invitrogen)で細胞を回収しました。 核を壊さず細胞質と膜タンパクを得たくて、細胞ペレットを1％Triton X100, 100mM NaCl, 25mM Trisに溶解したのですが、ゲノムが溶出したようで懸濁液の粘性が異常に高くなってしまいました。 Cell Dissociation Bufferの組成はわからないのですが、EDTA, グリセロール, クエン酸が入っているように書かれています。Cell Dissociation Bufferで回収したあとTritonX100処理すると、核膜は壊れてしまうものでしょうか？

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