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抗BrdU抗体による染色 トピック削除
No.2429-TOPIC - 2010/04/19 (月) 23:39:45 - gs86
この掲示板にはいつもお世話になっています。

さてこのたび妊娠マウスにBrdUを注射したのち胎仔のBrdU取り込みを染色してみようということになりました。
サンプルはgenotypeの異なるE8.5-9.5位のマウスでパラフィン切片を考えています。(whole embryoのほうがいいのかな。。。)

IFでもIHCでもいいのですが、経験者の方、お薦めの抗体(メーカー、クローン)などありましたら教えていただけませんでしょうか。さらに北米でも購入できるものがいいのですが。
また、固定法についてもBouinあるいは4%PFAを考えていますが、これについてもお薦め、問題点などありましたらお願いいたします。
 
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(無題) 解決済み 削除/引用
No.2429-9 - 2010/04/24 (土) 01:50:30 - gs86
みなさま、回答ありがとうございます。

PCのトラブルで返信が遅くなりすみませんでした。

GE,BD,Rocheのものなどちょっと考えてみます。

またInvitrogenからClick-itなるものが出ているのは知りませんでした。

今後の参考とさせていただきます。

改めてありがとうございました。


(無題) 削除/引用
No.2429-7 - 2010/04/21 (水) 22:19:13 - (-_-)
BDのマウスモノクロに一票。
熱処理等で抗原賦活化しないと染まりませんが。

(無題) 削除/引用
No.2429-6 - 2010/04/20 (火) 16:32:21 - Boston
私も Roche に一票。

(無題) 削除/引用
No.2429-5 - 2010/04/20 (火) 15:16:45 - mnf
近年、BrdUのかわりにEdUとクリックケミストリーを応用した
標識系が開発されています。
DNase処理が不要等メリットがそれなりにあるようです。

InvitrogenからClick-itの商品名で発売されています。

(無題) 削除/引用
No.2429-4 - 2010/04/20 (火) 14:27:46 - AP
人工アナログをハプテンとする抗体なので、そうそう特異性が低い製品はないと思いますが、Amersham (現GE)のもSigmaのも良好でした(どちらもmAb)。抗タンパク質抗体と違って、固定法も選ばないです。

GEはCell proliferation kitとして、ラベル溶液、一次抗体、二次抗体(PO標識)などをセットにしたものを売っていましたが、今では一次抗体のみのばら売りもしているようです。このキット、二次抗体がサブクラス特異的で、ノイズが非常に低かったです。

役に立つかはわかりませんが 削除/引用
No.2429-3 - 2010/04/20 (火) 13:36:27 - モンシロウ
私は使ったこと有りませんが、ラボの後輩がもっぱら着床前のマウス初期胚で免疫染色に使っている抗体です。

着床後の胚は扱ったことがないのでよく判りませんが、御役に立てれば。

Roche
Anti-bromodeoxyuridine(BrdU)
Cat No. 1170376

抗BrdU抗体による染色 削除/引用
No.2429-1 - 2010/04/19 (月) 23:39:45 - gs86
この掲示板にはいつもお世話になっています。

さてこのたび妊娠マウスにBrdUを注射したのち胎仔のBrdU取り込みを染色してみようということになりました。
サンプルはgenotypeの異なるE8.5-9.5位のマウスでパラフィン切片を考えています。(whole embryoのほうがいいのかな。。。)

IFでもIHCでもいいのですが、経験者の方、お薦めの抗体(メーカー、クローン)などありましたら教えていただけませんでしょうか。さらに北米でも購入できるものがいいのですが。
また、固定法についてもBouinあるいは4%PFAを考えていますが、これについてもお薦め、問題点などありましたらお願いいたします。

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