Bio Technical フォーラム

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IRESベクターの薬剤耐性で トピック削除
No.2413-TOPIC - 2010/04/17 (土) 12:24:28 - あ
IRESの前に目的の遺伝子、後ろに薬剤耐性（ピューロかネオ）を入れたベクターでstableの発現細胞を作っています。
トランスフェクトした細胞をFACSするとその遺伝子の発現は非常に低いのですが、この場合、後ろの薬剤耐性遺伝子の発現も連動して弱くなっていますか？この遺伝子に限ってピューロを入れると全滅してしまうので疑っています。発現しにくい遺伝子をいれると、IRES前後の発現量は連動するものでしょうか？（トランスクリプトの量をみれば良いのでしょうけれど。。。）
　
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そうですね 削除/引用
No.2413-2 - 2010/04/23 (金) 14:29:44 - chlh
「発現しにくい」原因によるでしょう

IRESベクターの薬剤耐性で 削除/引用
No.2413-1 - 2010/04/17 (土) 12:24:28 - あ
IRESの前に目的の遺伝子、後ろに薬剤耐性（ピューロかネオ）を入れたベクターでstableの発現細胞を作っています。
トランスフェクトした細胞をFACSするとその遺伝子の発現は非常に低いのですが、この場合、後ろの薬剤耐性遺伝子の発現も連動して弱くなっていますか？この遺伝子に限ってピューロを入れると全滅してしまうので疑っています。発現しにくい遺伝子をいれると、IRES前後の発現量は連動するものでしょうか？（トランスクリプトの量をみれば良いのでしょうけれど。。。）
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