初心者で申し訳ありません。
シークエンスするためにPCR産物を作ろうとプライマーを作りアニーリング温度を変えたりDMSOを使ったりなどを行ってました。
今のところあまりうまくいかず,プライマーを変更しようと検討していたのですが…。
その遺伝子でプライマー3にて検索し出てきたプライマーを、プライマー3に入力し検索すると検索結果が違う遺伝子で出たりします。そういうプライマーは使用してもあまり意味がないと考えた方がいいのでしょうか?
また,論文により,mRNA,complete.cdsの配列をシークエンスしたものとexonごとにプライマーを作りシークエンスしているものが認められます。どちらでシークエンスした方がよいのでしょうか?
申し訳ありませんが,御教授の程宜しくお願いします。 |
|