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(無題) 削除/引用 No.2386-3 - 2010/04/13 (火) 15:12:05 - 組織 濃すぎると、特に蛍光染色の時は、バックも同程度の強さになってしまって、シグナルが判別しづらくなるかもしれませんね。 原則として、抗体反応は室温で短時間よりも、4℃で長時間の方が非特異が抑えられてきれいに染まります。ただ抗原・抗体にもよるので、室温が駄目だというわけではないです。大抵の抗体は室温で反応させても、4℃と遜色なく染まります。

(無題) 削除/引用 No.2386-2 - 2010/04/13 (火) 12:38:27 - あ 濃すぎて染まらないというのは、そうなったことも聞いたこともありません。理由も思いあたりませんが。濃すぎて標本がものすごく光り輝いてしまったことはありますが。。。 培養細胞の染色でしたら大抵３０分で十分です。急いでいるときは１５分とかで洗ってしまいます。

免疫染色の抗体濃度と反応時間 削除/引用 No.2386-1 - 2010/04/13 (火) 11:01:56 - KR くだらない質問になってしまうかもしれませんが、免疫染色の抗体濃度は、濃くし過ぎるとノンスペがでると認識していますが、あまりにも濃すぎると、染まらないということは考えられますか？・・・また、反応時間を長くすれば浸透がよくなり、また温度は4℃よりRTのほうが浸透がよくなりそうですが、RTで2-overnight というのは、あまり論文で見かけず、あっても、4℃で2-overnight なのには、なにか理論的なものがあるのでしょうか？もしこれらのことに関して経験がありましたら、教えてください。よろしくお願いいたします。

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