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(無題) 削除/引用 No.2384-6 - 2010/04/14 (水) 08:21:02 - けい >へのへの様 私も凍結保存したサンプルでリン酸化が見えるか（フレッシュなものとどれくらい変わるのか？）興味がありますので、もし試されましたら結果を教えていただけると助かります。

(無題) 削除/引用 No.2384-4 - 2010/04/13 (火) 19:12:57 - TS ＞一度サンプルバッファーに溶かしてしまうと、凍結融解のたびにリン酸化が弱くなっていくように思えました。 同感です。繰り返しの程度にもよるのでしょうが、不思議（？）と減っていきますね。化学的にリン酸基がはずれちゃうんでしょうか？？ 液体窒素で凍結後、−８０度で保存だったら、大丈夫な気がします（すみませんが、経験的に）。もっと重要なのは、組織を融解して、Lysis bufferにホモジナイズするときに、すばやくホスファターゼインヒビターやプロテアーゼインヒビターを浸透させることができるような条件にすることのような気がします。 ま、ｐさんがおっしゃるように、試されるのが一番安全ですけどね。

(無題) 削除/引用 No.2384-3 - 2010/04/13 (火) 18:51:54 - p 一度試すにこしたことは無いと思う。

(無題) 削除/引用 No.2384-2 - 2010/04/13 (火) 16:59:16 - けい 一度サンプルバッファーに溶かしてしまうと、凍結融解のたびにリン酸化が弱くなっていくように思えました。それ以来、リン酸化はフレッシュなサンプルで見るようにしています。 ただ、手を加えずに凍結しておいたサンプルがどうなるかはちょっとわかりません。

ウエスタン用組織の凍結保存は可能ですか？ 削除/引用 No.2384-1 - 2010/04/13 (火) 08:27:27 - へのへの ウエスタンブロッティングの組織からのサンプル調整をおこないます。いままで生組織ですぐにホモジナイズして調節していたのですが、どうしても用事がありすぐにできません。液体窒素に入れて凍結してもリン酸化蛋白の検出は変わらないものでしょうか？

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