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FACSのFSC/SSC調整について トピック削除
No.2376-TOPIC - 2010/04/11 (日) 22:55:58 - bio
最近、今まで使っていたBDのFACSカリバーが故障し、同機種ですが、機械を交換しました。

機械が変わったので、またFSC/SSCの調整が必要になったのですが…

今までは先輩が残していったデータから呼び出していたのですが・・・、
自分で細胞集団が中央に小さくうまくまとまるように調整するにはどうしたらよいのでしょうか?

Amp,Gain,voltageの意味、調整方法をおしえていただけませんか?

今のところ、自力では、細胞集団が散乱してしまっています。
ドットプロットで右に線のように細胞が現れるので、
ボルテージ(だったかな?)を限界まで下げましたが、
うまく細胞集団がまとまりません…

ちなみに、いつもは、そこでだいたい生きている細胞にゲートをかけ、
さらにFL1FL2でAnnexin VとPIで解析していますが…

よろしくお願いいたします。
 
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(無題) 削除/引用
No.2376-2 - 2010/04/12 (月) 11:45:15 - mouse
FSC/SSCをlinearにしてvoltageを調節して、中央より左下にリンパ球のゲートを持ってくるのが普通です。
それ以上のAmpやGainの調節が必要であれば、BDのメンテのテクニシャンにやってもらった方がいいと思います。

FACSのFSC/SSC調整について 削除/引用
No.2376-1 - 2010/04/11 (日) 22:55:58 - bio
最近、今まで使っていたBDのFACSカリバーが故障し、同機種ですが、機械を交換しました。

機械が変わったので、またFSC/SSCの調整が必要になったのですが…

今までは先輩が残していったデータから呼び出していたのですが・・・、
自分で細胞集団が中央に小さくうまくまとまるように調整するにはどうしたらよいのでしょうか?

Amp,Gain,voltageの意味、調整方法をおしえていただけませんか?

今のところ、自力では、細胞集団が散乱してしまっています。
ドットプロットで右に線のように細胞が現れるので、
ボルテージ(だったかな?)を限界まで下げましたが、
うまく細胞集団がまとまりません…

ちなみに、いつもは、そこでだいたい生きている細胞にゲートをかけ、
さらにFL1FL2でAnnexin VとPIで解析していますが…

よろしくお願いいたします。

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