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BSA溶液フィルターろ過 トピック削除
No.2344-TOPIC - 2010/04/04 (日) 21:33:36 - vanilla sugar
これまでELISAに使用するブロッキング用の1%BSA-PBS溶液を作成する際特にフィルターろ過はしていませんでした。
オートクレーブ済の99gのPBSに1gのBSAを入れ、4℃で一晩静置し、翌日に常温に戻し軽くスターラーで撹拌したものを使用していました。
フィルターろ過したものでブロッキングした方がよいのでしょうか。
今までは使い切りで、長期保存はしていません。今後長期保存する場合は10倍濃縮で作成しミリポア製のGVWPO4700 (0.22-,um-pore-size) フィルターがあるのでろ過して保存してみようと思っています。
ブロッキング用1%BSA-PBS溶液作成時のフィルターろ過のメリットをご教授お願いします。
 
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(無題) 解決済み 削除/引用
No.2344-3 - 2010/04/05 (月) 12:28:32 - vanilla sugar
TS様ご教授有難うございます。今までバックグランドが高く出たり、データがばらついたりしたことはないのでそのままのプロトコールでやることにします。
ご指摘のとおり、長期保存時は念のためにフィルターろ過しておいたほうがよいと思いました。

(無題) 削除/引用
No.2344-2 - 2010/04/05 (月) 11:26:24 - TS
Elisa目的であれば、特にどちらでも良いのではないでしょうか?

濾過すると、
・腐らない。長期保存可能。凍結したりで、かなりもつ。
・なにかしら溶液中にある小さい粒子(BSA試薬由来)が除ける

くらいなもので、いままでうまくいっているのであれば、
そのままで良いのではないでしょうか?

BSA溶液フィルターろ過 削除/引用
No.2344-1 - 2010/04/04 (日) 21:33:36 - vanilla sugar
これまでELISAに使用するブロッキング用の1%BSA-PBS溶液を作成する際特にフィルターろ過はしていませんでした。
オートクレーブ済の99gのPBSに1gのBSAを入れ、4℃で一晩静置し、翌日に常温に戻し軽くスターラーで撹拌したものを使用していました。
フィルターろ過したものでブロッキングした方がよいのでしょうか。
今までは使い切りで、長期保存はしていません。今後長期保存する場合は10倍濃縮で作成しミリポア製のGVWPO4700 (0.22-,um-pore-size) フィルターがあるのでろ過して保存してみようと思っています。
ブロッキング用1%BSA-PBS溶液作成時のフィルターろ過のメリットをご教授お願いします。

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