Bio Technical フォーラム

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細胞片とタンパク質の分離 トピック削除
No.2342-TOPIC - 2010/04/03 (土) 20:16:32 - はな
こんばんは。初歩的な質問かもしれませんがご容赦ください。

CaymanのS-Nitrosylated Protein Detection Kitを使って、
タンパク質の精製を行っています。

ライセートを作った後のプロトコルが、「tabletop centrifugeを使い４度で１０分」としか書いていないのですが、タンパク質を上清に残したい場合どのくらいのＧで回せば良いのでしょうか？

MAXで回してみたら、と言われて（16000Ｇくらいだと思います）試したのですが、最終結果が２回とも検出できませんでした。元々のタンパク質量が少なかったのかと思い、最初の細胞量を増やしてみても変わらず。
おそらくこのステップでひっかかっていると思われるのですが…。

何かご存知の方いらっしゃいましたらご教授願います。
　
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(無題) 削除/引用
No.2342-2 - 2010/04/03 (土) 22:28:29 - 細胞
16000 Gはなにかの間違いでは？

細胞片とタンパク質の分離 削除/引用
No.2342-1 - 2010/04/03 (土) 20:16:32 - はな
こんばんは。初歩的な質問かもしれませんがご容赦ください。

CaymanのS-Nitrosylated Protein Detection Kitを使って、
タンパク質の精製を行っています。

ライセートを作った後のプロトコルが、「tabletop centrifugeを使い４度で１０分」としか書いていないのですが、タンパク質を上清に残したい場合どのくらいのＧで回せば良いのでしょうか？

MAXで回してみたら、と言われて（16000Ｇくらいだと思います）試したのですが、最終結果が２回とも検出できませんでした。元々のタンパク質量が少なかったのかと思い、最初の細胞量を増やしてみても変わらず。
おそらくこのステップでひっかかっていると思われるのですが…。

何かご存知の方いらっしゃいましたらご教授願います。
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