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組織からのRNA抽出について トピック削除
No.2335-TOPIC - 2010/04/02 (金) 12:23:36 - みゅー
マウス膝組織よりRNAを抽出しています。
手順は、マウス膝組織をRNAlater中で-20度保存→凍結粉砕し、TRIzolへ→ポリトロンによるRNA抽出→RNeasy kitによるRNA精製 です。

質問は、凍結粉砕しTRIzolに入れた段階で(ポリトロンによるRNA抽出前に)サンプルを保存することは可能かということです。
ポリトロンがうちのラボにないため、できれば、凍結粉砕後TRIzolに入れた段階のサンプルをストックしておいて、一度にポリトロン処置にもっていければと思っています。

RNA抽出効率への影響の有無など、ご存知の方がいらっしゃったら、ご教授していただきますようお願い申し上げます。
 
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(無題) 削除/引用
No.2335-2 - 2010/04/05 (月) 11:45:59 - transplant
多分大丈夫な気がします。

凍結粉砕の具合によりますが、トリゾルが組織にちゃんと染みていればRNaseは動かないでしょうし。
保存は、トリゾル中なら−40でも大丈夫かなぁ。
−80のほうが精神衛生上は良いかもしれませんが。

抽出効率はわかりませんが、しっかり処理できてればそう変わらないんじゃないでしょうか。

以前「培養細胞をトリゾルで保存できるか」的なトピを見かけたような。
そちらも参考になるかも。

組織からのRNA抽出について 削除/引用
No.2335-1 - 2010/04/02 (金) 12:23:36 - みゅー
マウス膝組織よりRNAを抽出しています。
手順は、マウス膝組織をRNAlater中で-20度保存→凍結粉砕し、TRIzolへ→ポリトロンによるRNA抽出→RNeasy kitによるRNA精製 です。

質問は、凍結粉砕しTRIzolに入れた段階で(ポリトロンによるRNA抽出前に)サンプルを保存することは可能かということです。
ポリトロンがうちのラボにないため、できれば、凍結粉砕後TRIzolに入れた段階のサンプルをストックしておいて、一度にポリトロン処置にもっていければと思っています。

RNA抽出効率への影響の有無など、ご存知の方がいらっしゃったら、ご教授していただきますようお願い申し上げます。

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