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ありがとうございます 削除/引用 No.2327-9 - 2010/04/15 (木) 06:33:28 - はじめ plecoさん、補足ありがとうございます。 気が付きませんで、申し訳ございませんでした。 実際に、マウスを開けてやってみたところ、骨盤から20,000,000のセルが採取できました。 考えていたより、骨が大きく、骨髄の線が見れたため、骨を押しつぶさず、注射器を使いフラッシュしてやりました。 足からの骨髄とは別に、FACSしたところ、結果が同等だったので、次からは一緒にまとめてしようと考えています。 余分に20,000,000ものセルが取れるようになったので、とても嬉しいです。 皆様本当にありがとうございました。

(無題) 削除/引用 No.2327-8 - 2010/04/05 (月) 10:02:31 - pleco すみません、トピを閉められた後ですが補足を。 骨はすべての部位をハサミで 1-2mm幅程度に（適当に） 輪切りしてからすりつぶします。 すりつぶすというより、骨の切断面から中の骨髄を押し出すようにしてください。 最初はそれほど力を加えなくても、多くの細胞が回収できるはずです。 （最初から力ずくでやると細胞がダメージを受けて死細胞が増えます） 上清を回収した後、２回目、３回目と繰り返しながらだんだん力を加えていきます。 最後には骨がミンチ状になるまで採りつくします。 うまく回収できるようお祈りしています。

ありがとうございました 削除/引用 No.2327-7 - 2010/04/04 (日) 04:12:47 - はじめ amiさん、gs86さん、plecoさん 誠に丁寧な回答ありがとうございました。 gs86さん、採取の丁寧な説明ありがとうございます。 明日にでもマウスをあけて試して見ます。 皆様本当にありがとうございました。

(無題) 削除/引用 No.2327-6 - 2010/04/03 (土) 07:03:31 - gs86 骨と一緒にPBS+2%FCS(なんでもいいと思いますが、私の場合はこれがFACS用のbufferなので）を少量入れ、ある程度押しつぶしたら液体部分をピペットで回収します。これを２−３回繰り返して骨も液体部分も赤みがなくなったらそれを目安として終了としています。たぶん骨を粉々まではしていません。細胞がつぶれてしまうかどうかは、検討したことがないのでわかりません、すみません。 この説明でおわかりいただけるでしょうか。

(無題) 削除/引用 No.2327-5 - 2010/04/02 (金) 23:55:06 - はじめ amiさん 上腕骨からは試してなかったので、やってみます gs86さん、plecoさん Morter&Pestleでは試みたことがありませんでした。 いつも注射器でフラッシュしていました。 gs86さん すりつぶす場合、どの程度骨を壊しますか？ 粉々になるまでか、半壊ぐらいでしょうか？ それとも骨も粉みじんぐらいでしょうか？ plecoさんは骨はあまり壊さないのでしょうか？

(無題) 削除/引用 No.2327-4 - 2010/04/02 (金) 16:13:30 - pleco gs86さんと同様の方法で採取しています。 あまり強くすりつぶさずに（細胞もつぶれてしまうので） 骨から細胞を押し出すようにしています。

(無題) 削除/引用 No.2327-3 - 2010/04/02 (金) 07:38:13 - gs86 私の場合、骨盤と両大腿、両下腿、両上腕を使ってます。 比べたことはないですが、骨盤からは結構とれるのではと思いますが。 全部の骨をまとめてmortarに入れ、pestleですりつぶしてフィルターかけます。

(無題) 削除/引用 No.2327-2 - 2010/04/02 (金) 00:46:52 - ami 上腕骨からとってます。あとは難しいので個体数を増やすしかないと思ってます。 注射針でフラッシュしてとってます。

マウスの骨髄が大量に必要なとき、どこから採取しますか？ 削除/引用 No.2327-1 - 2010/04/02 (金) 00:30:57 - はじめ 初めまして皆さんこんにちわ マウスから出来る限り多くの骨髄を採取したいのですが、大腿骨や脛骨以外（例えば背骨とか）から骨髄を採取することは可能ですか？ その場合、どのような手法で行いますか？ よろしくお願いします。

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