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(無題) 削除/引用 No.2303-3 - 2010/03/27 (土) 22:35:24 - ウミシイタケ sさんメッセージありがとうございます。 直接wellにRLBを加えて凍結融解しスクレイパーの使用や遠心操作は行っていないのですね。 参考にさせていただきます。

(無題) 削除/引用 No.2303-2 - 2010/03/27 (土) 15:57:49 - s 自分の場合ですが… 培地を除去、PBSで洗浄後、各wellにRLBを加え -80℃のディープフリーザーで凍結（2〜5分）。 37℃のインキュベータ中で融解したものを、 そのままサンプルとして用いています…。

Dual-Glo luciferase assay kit 削除/引用 No.2303-1 - 2010/03/27 (土) 05:44:02 - ウミシイタケ Dual-Glo luciferase assay kitについてお尋ねいたします。 オートインジェクターなしのプレートリーダタイプのルミノメーターしかラボになく、24wellでのトランスフェクションが確立していることから24wellでトランスフェクション後、96wellでDual-Glo luciferase assay kitを使用したいと考えております。 プロメガのQ&Aにこのようにあります。 Q. 96ウェルプレート以外で細胞を培養した場合、どのように測定すればよいですか？ 培地と等量のDual-GloTM Luciferase Reagentを添加してから、測定できます。但し、プレートのサイズによっては大量の試薬が必要になることがあります。 試薬量を節約するために、あらかじめ細胞を溶解してから測定することも可能です。細胞溶解剤はReporter Lysis Buffer（以下RLB） (カタログ番号：E3971)をお使いください。RLBを加えた後、凍結融解し、ライセートと等量のDual-GloTM Luciferase Reagent を加えて測定します。あるいは、細胞にPBSまたは培地を加え、凍結融解による細胞破砕後、等量のDual-GloTM Luciferase Reagent を加えて測定することも可能です。 試薬を節約したいのでlysateを調整後測定したいと考えております。 メーカーに問い合わせましたが、資料はないようで凍結融解（液体窒素またはドライアイス,メタノールと37度）で調整してくださいとのことでした。 経験のある方がいらっしゃいましたらどのようにlysate調整を行っているか教えていただけないでしょうか？ よろしくお願いいたします。

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