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解決です 削除/引用 No.2297-9 - 2010/03/27 (土) 23:58:53 - ７７４

(無題) 削除/引用 No.2297-8 - 2010/03/27 (土) 23:56:23 - ７７４ 細胞が大丈夫であるなら、わざわざ無駄なことをする必要性はないということです。 くまさんの意見に概ね同意で参考とさせていただきます。

(無題) 削除/引用 No.2297-7 - 2010/03/27 (土) 23:00:37 - TK-1 >[Re:3] ７７４さんは書きました : > 確かにそれも可能なのですが、mediumもdishも労力も余計に使ってしまうことになるので、大丈夫ならそれが一番かと思いまして。

(無題) 削除/引用 No.2297-6 - 2010/03/27 (土) 10:19:55 - ７７４ 勘違いされているようなのですが、何も労力を使いたくないわけではないし、dishもmediumも普段大量に使っているので、今回のパッセージに使う分量ぐらいは大したものではありません。もしもう一回パッセージを挟んだ方がいいのなら、よろこんでやります。むしろ実験が増えるならうれしいくらいです。 ただ、この先にもこういうことがあるかもしれないため、選択肢が多いに越したことはないので、選択肢を増やす意味でもここで質問しています。 回答は非常にありがたく、いつも参考にさせてもらっているのですが、色々なトピを見ていて思うのは、残念ながら質問者に対して馬鹿にするような発現が含まれている場合があることです。非常に不適切だと思います。

(無題) 削除/引用 No.2297-5 - 2010/03/27 (土) 05:46:23 - TK-1 まとめてMMC処理してfreezeして使ってますが、困ったことはありません。自分用に年に７、８個くらいのmutantを作っていますが、今まで問題があったことはありませんし、所詮はfeederですから。 間に余分に一回splitするだけで、どれだけのmediumとdish、労力が余計にかかってしまうのでしょうかね。 限られた時間で効率よく仕事をこなしていかないとやっていけない世界です。少しばかり余分にかかるmediumとdish、労力を気にするよりも、もっと他に気を使わないといけないことはあると思いますよ。

(無題) 削除/引用 No.2297-4 - 2010/03/26 (金) 13:21:23 - くま いいのか悪いのかの知見はないのですが、 こういうのって、うまく行ってるシステムは変えない方がいいと思います。 後々になって、あそこだけ変えたのがひょっとして・・と悩むより、 MEFとかディッシュとかをケチらない方がいいと思います。

(無題) 削除/引用 No.2297-3 - 2010/03/26 (金) 12:11:59 - ７７４ 確かにそれも可能なのですが、mediumもdishも労力も余計に使ってしまうことになるので、大丈夫ならそれが一番かと思いまして。

(無題) 削除/引用 No.2297-2 - 2010/03/26 (金) 11:51:32 - TK-1 もう一回splitするか、少し薄めにまいちゃだめなんですか？

ES細胞用のフィーダー細胞 削除/引用 No.2297-1 - 2010/03/26 (金) 00:00:08 - ７７４ ノックアウトマウスを作製しており、MEFのMMC処理までに関して質問があります。 方法論的には特に問題はないのですが、急遽現場を離れないといけなくなったため困っていることがあります。 現在MMC処理をするためにMEFをカルチャーしているのですが、コンフルになった状態からプラス一日経ってからしかMMC処理できそうにありません。 教科書的にはMMC処理したMEFは４日経ったら使用しない、といったようなことがあるように、コンフルの状態で時間が経ち過ぎたMEFは使用してはならない、といったようなことはあるのでしょうか？ 心配なのは使用することによってESが影響を受け、germlineに乗らなくなるといったようなことです。 正直それよりも普段(パッセージ等)影響の方がより大きい気がしますが・・・。 参考までに、MEFはストックチューブから１５センチdishに起こして２日でコンフルになり、そこから同１５センチdishに８倍でパッセージを行いました。通常なら３日でコンフルになります。 つまり、パッセージ後４日でMMC処理してフィーダーとして使用しても問題無いかということです。 よろしくお願いします。

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