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(無題) 削除/引用 No.2259-3 - 2010/03/18 (木) 16:32:17 - しょ 投稿前に何度やってもフォーラム内検索ができず、急いでいたので質問してしまいました。 にもかかわらず快くご回答いただきありがとうございました。さっそく試してみます。

(無題) 削除/引用 No.2259-2 - 2010/03/18 (木) 16:20:33 - AP よくありがちで、この場でも何度も指摘されていることですが、 抗体は保存中にアグリゲートしてパーティクルを生じることがあって、これが粒状のノイズの原因になります。もし、現在そういうことに配慮していないのでしたら、使用前に十分遠心して上清をとるとか、希釈した後、フィルターをとおすとかすると良いと思います。

蛍光免染におけるバックグランドについて 削除/引用 No.2259-1 - 2010/03/18 (木) 14:32:51 - しょ 現在、小胞内タンパクの蛍光免染を行っています。 その際に、なぜか抗mouse IgG-Cy3, 抗mouse IgG-FITC, 抗rabbit IgG-rhodamin標識二次抗体「だけ」で染色した場合でも、 小胞が染まったかのように、点々と蛍光が観察されます。 しかも、抗rabbit-FITCだとその現象は起こりません。 2次抗体の標識物質や抗原種によって、バックグラウンドの違いがでるのでしょうか？ あるいは単に、観察されたサンプルの洗浄があまいだけでしょうか？ 何か解決策をご存知の方がいらっしゃれば、ご指摘お願いいたします。 ＊手順は、 �@細胞を4%パラホルムアルデヒドで10min固定 �APBS洗浄 �B100ug/mlジギトニンで膜可溶化10min �CPBS洗浄 �D2次抗体アプライ、37℃30min �EPBS洗浄10分、三回 です

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