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特注のコーム、SDS-PAGE トピック削除
No.2252-TOPIC - 2010/03/18 (木) 00:19:27 - TS
いつも勉強させて頂いています。

SDS-PAGE用のコームを作成してくれる業者はありますでしょうか?

現在、バイオラッドのミニプロテアンシリーズを使用しているのですが、
純正で市販されているコームのローディングサンプル数は15ウェルまでです。20とか30くらいまで一枚のゲルで流せると、色々と便利だなと思うのですが、自作するのは少々難しそうですし、それなりの金額で外注できないかと思っています。

ご存じの方、おりましたら是非教えて頂けると助かります。
よろしくお願いします。
 
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No.2252-11 - 2010/03/19 (金) 10:27:50 - TS
みなさん、ありがとうございました!

結構いろいろなところがやってくれるのですね。
出入りの業者さんに、教えて頂いたメーカーのなかから、良さそうなところを探して頂こうかと思います。

これで、実験効率の向上、抗体の節約、定量性の向上が期待できます。
本当にありがとうございました。

(無題) 削除/引用
No.2252-10 - 2010/03/18 (木) 20:17:23 - toyo
以前関連トピをたてたのでレスします。

私のラボではシャークコームの自作を依頼したことがあります。
テフロン製のものは職人さんが手で加工するとのことで 5000円/枚くらいしました。
ミニゲルサイズでは25レーンくらい、ワイドゲルサイズでは45レーンくらいでした。
コームの櫛歯が2mm幅、歯と歯のすき間が1mm幅の繰り返し(3mmピッチ)だったと思います。

テフロンは素材の性質上空気を含んでいて、テフロン周辺のアクリルアミドが
固まりにくいのでコームを抜きやすいということですが、ウェルとウェルの
間の壁がこのくらい細くなると、壁がしっかり固まらずに、コームを抜いた
ときに壁がズレやすくなってしまいます。
クリスタルチップの先で1ウェルずつ直すことはできますが、隣のレーンに
サンプルが漏れたりしないか心配になります。
また、検出したバンド間の横方向のスキマがあまり綺麗に空かないので、
レーンを切り分けて定量する際に問題になることがあります。

そこで、1mm厚のアクリル板を使って、櫛歯を台形にしたものをレーザー加工
業者に頼んで作成してもらいました(3000円/枚位)。
ワイドゲルサイズに2.5mmピッチで52レーンというキワモノですが、レーザー
加工なので精度は高いです。
また、ウェル間の壁が崩れることもないですし、バンド間の横方向のスキマも
綺麗に空きます。

1wellあたりのロード量が10uLぎりぎりになってしまうのと、アクリル板の
耐久性が不明なのが難点ですが、一枚のゲルに多数のサンプルを載せるという
目的であればお奨めしておきます。

(無題) 削除/引用
No.2252-9 - 2010/03/18 (木) 18:32:44 - km
アクリル性のコームになりますが、設計図を送ればシーマバイオテック株式会社でも作ってくれます。

(無題) 削除/引用
No.2252-8 - 2010/03/18 (木) 13:50:39 - ポリコーム
東大・医科研の大海先生が、多ウェルのコームの自作法について書いておられます。元々は細胞工学の連載なので、ネットで読めるものには図がありませんが、参考になるかもしれません。

http://www.ims.u-tokyo.ac.jp/ohmiken/Lab%E3%83%A1%E3%83%A2/memo%202.html

(無題) 削除/引用
No.2252-7 - 2010/03/18 (木) 13:01:50 - Pumpkin
あ、確かに日本エイドーでもやってくれた記憶があります。バイオクラフトと日本エイドー両方に聞いてみてはいかがでしょうか。

(無題) 削除/引用
No.2252-6 - 2010/03/18 (木) 12:17:54 - Kanata
調べたところ、日本エイドーさん(もしくはその代理店)にお願いして作っていただいたようです。ウェブサイトにあるカタログには掲載されていなかったので、相談の上作ってもらったのだと思います。
価格も不明でが、そんなに裕福とはいえない私たちのラボでも購入できる価格だったので、そこそこだと思います。

断片的な情報で申し訳ありません。

(無題) 削除/引用
No.2252-5 - 2010/03/18 (木) 10:05:22 - Pumpkin
バイオクラフトで対応してくれると思いますよ。ATTOでも対応してくれそうですけどね(多分)。シャークティースコームは、いくつか作ってもらったことあります。一度、相談されてみてはいかがでしょうか。既成品であっても殆どハンドメイドですから、それなりの値段でやってくれるのではないでしょうか。

(無題) 削除/引用
No.2252-4 - 2010/03/18 (木) 09:44:06 - TS
Kanataさん:

ありがとうございます。日本におります。

知人がAttoのシステムを使用していて、そのミニゲルでは28だったか、そのくらいのコームがあるようで。うらやましい、と思ったのが、探してみようと思った発端です。私も、20以上流したりすると、投稿するようなきれいなバンド像はでないのかな、とは思っているのですが、1つの実験のサンプルを1枚のゲルで対応できると、定量性も少し安定するような気もしておりまして。

よろしくお願いします。

自作も考えないとダメかもしれませんが。。。

追記です 削除/引用
No.2252-3 - 2010/03/18 (木) 06:04:16 - Kanata
ただ、ミニプロテアンのサイズで20や30のコームというのは、サンプルを流したときにレーンがくっついてしまいがちで少々厳しいのではと思うのですが、いかがでしょうか。

(無題) 削除/引用
No.2252-2 - 2010/03/18 (木) 06:01:37 - Kanata
TSさん

差し支えないようでしたら、日本での業者さんか海外でか伺っても構いませんか?
日本のラボで(20センチサイズのゲルでですが)まさに櫛のようなコームを作ってもらったことがあります。随分昔になってしまうんですが、メーカーさんの名前を調べてみます。

自作もしました。100円均一ショップで透明な下敷きを購入して作りました・・・。

特注のコーム、SDS-PAGE 削除/引用
No.2252-1 - 2010/03/18 (木) 00:19:27 - TS
いつも勉強させて頂いています。

SDS-PAGE用のコームを作成してくれる業者はありますでしょうか?

現在、バイオラッドのミニプロテアンシリーズを使用しているのですが、
純正で市販されているコームのローディングサンプル数は15ウェルまでです。20とか30くらいまで一枚のゲルで流せると、色々と便利だなと思うのですが、自作するのは少々難しそうですし、それなりの金額で外注できないかと思っています。

ご存じの方、おりましたら是非教えて頂けると助かります。
よろしくお願いします。

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