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(無題) 削除/引用 No.2242-5 - 2010/03/17 (水) 20:11:57 - azuki LDHは細胞膜の損傷を評価でき、鋭敏でハイスループットなアッセイ系なのでよいかもしれませんね。 MTTやWSTは細胞膜の初期の損傷を評価するのには適さないと思います。

素人意見 削除/引用 No.2242-4 - 2010/03/17 (水) 11:13:22 - sin 「比較」が目的でしたら、 普通にトリプシン処理しても差が出にくい気がしますので、 むしろ処理時間を延ばしていって生存細胞数を定量するとか・・・

(無題) 削除/引用 No.2242-3 - 2010/03/17 (水) 10:40:54 - TS 指標としては、細胞のざっぱな「活性」を見るようなことをしたいということでよいですよね。あまり特定の分子の消化だけを見るのではなくて。 剥離後、固定して死細胞を染色して、FACS解析にまわすとか。Permeabilizationをしないで、PI染色をすれば、死細胞、あるいは弱っている細胞だけ染まることになるような。 他には、剥離して、サスペンドした後に、WST assayをしてみるというのはどうでしょうか？　一定数の細胞懸濁液を調製して、WST solutionを添加、一定時間後に吸光度を測定、とか。 剥離、遠心後の上清中に放出されたLDH活性を測定してみるとか。 剥離、再播種後の接着速度を見るとかは、あまり定量的には難しそうですよね。 あまり思いつきませんが、他の人の意見はどうでしょう。

ダメージってなに？ 削除/引用 No.2242-2 - 2010/03/17 (水) 10:07:01 - ats ダメージを限定すれば、おのずと方法は見えてくるのでは？

トリプシン処理のダメージ測定 削除/引用 No.2242-1 - 2010/03/16 (火) 22:03:37 - 神戸さん 各種メーカーの酵素処理液を比較したいと思います。 トリプシンなどの酵素で接着細胞を剥離させたときに 細胞がダメージを受けると思うのですが， どの程度ダメージを受けているかを 定量的に測定する方法ってありませんでしょうか。 ご教示くださいませ。

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