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リン酸化抗体を用いたリン酸化蛋白質の検出
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No.2232-TOPIC - 2010/03/15 (月) 13:46:48 - リン酸化蛋白質初心者
リン酸化蛋白質をリン酸化抗体で検出しています。
この際、n数を増やして同じメンブレン上で検出しているのですが、抗体のバンドの濃さがサンプル間でバラバラで困っております。
リン酸化蛋白質は同じ細胞でもバラツキが生じやすいのでしょうか?
細胞回収時は、Lysis bufferにPhosSTOP,CompleteMiniを溶かしたものを使用しているので、不思議で仕方ありません。
よろしくお願いします。
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No.2232-1 - 2010/03/15 (月) 13:46:48 - リン酸化蛋白質初心者
リン酸化蛋白質をリン酸化抗体で検出しています。
この際、n数を増やして同じメンブレン上で検出しているのですが、抗体のバンドの濃さがサンプル間でバラバラで困っております。
リン酸化蛋白質は同じ細胞でもバラツキが生じやすいのでしょうか?
細胞回収時は、Lysis bufferにPhosSTOP,CompleteMiniを溶かしたものを使用しているので、不思議で仕方ありません。
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