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ELISAに使用可能な抗タグ抗体 トピック削除
No.2219-TOPIC - 2010/03/12 (金) 14:24:51 - EJ
N末にHAタグを付加したリコンビナント蛋白の発現の確認、定量、などを、ELISAで行う事が出来る抗体の組み合わせ(例えば、キャプチャー用のHAのN末端認識モノクロと、ペルオキシダーゼ標識抗HAタグポリクロ、の組み合わせ、など。)を御存知でしたら、メーカー、型番、など教えて頂けるでしょうか。

GenScriptでは、抗タグ抗体でELISA、と書いてある製品は確かにあるんですが、問い合わせてみたら、全く実績が無いそうで、、、。

抗タグ抗体でELISAが出来るのなら、それなりに役に立つと思うのですが。

HAに限りません。

myc、flag、その他、、、

あまり需要無いのかな。

人柱か、、、、
 
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No.2219-7 - 2010/03/14 (日) 16:15:45 - ats
もしかして、HAタグ一つで検出しようと考えているのでしょうか?
そうだとすると、HA・FLAG・mycタグは抗体と比較して小さいので、2種の抗体が同時に結合できません=ELISAは無理。
GSTやGFPなど比較的大きいtagや、検出したいタンパクのN末にHA・C末にFLAG等ならIP可能な抗体でELISAが可能です。

(無題) 削除/引用
No.2219-6 - 2010/03/13 (土) 03:10:55 - どら
いまいち状況がつかめませんが、ドットブロット→westernではだめなのですか?

ELISAにこだわるならば、抗体を作っているときのスクリーニングはELISAでやっていそうだからどれもできそうなのだけれども。

(無題) 削除/引用
No.2219-5 - 2010/03/12 (金) 23:01:45 - qq
>(例えば、キャプチャー用のHAのN末端認識モノクロと、ペルオキシダーゼ標識抗HAタグポリクロ、の組み合わせ、など。)
、、、10-30残基のタグをサンドイッチで検出ということですか?可能なのでしょうか??
キャプチャー抗体+タグ付きタンパク+タグ付きHRPでcompetition assayは、可能かもしれませんが、どうでしょうかね?

(無題) 削除/引用
No.2219-3 - 2010/03/12 (金) 18:47:44 - EJ
折角のコメントに申し訳ないけど、実験系の正当さ、的確か否か、を誰かに計って確認したい訳ではありません。

(無題) 削除/引用
No.2219-2 - 2010/03/12 (金) 18:12:18 - 細胞
westernでいいでしょう

ELISAに使用可能な抗タグ抗体 削除/引用
No.2219-1 - 2010/03/12 (金) 14:24:51 - EJ
N末にHAタグを付加したリコンビナント蛋白の発現の確認、定量、などを、ELISAで行う事が出来る抗体の組み合わせ(例えば、キャプチャー用のHAのN末端認識モノクロと、ペルオキシダーゼ標識抗HAタグポリクロ、の組み合わせ、など。)を御存知でしたら、メーカー、型番、など教えて頂けるでしょうか。

GenScriptでは、抗タグ抗体でELISA、と書いてある製品は確かにあるんですが、問い合わせてみたら、全く実績が無いそうで、、、。

抗タグ抗体でELISAが出来るのなら、それなりに役に立つと思うのですが。

HAに限りません。

myc、flag、その他、、、

あまり需要無いのかな。

人柱か、、、、

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