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(無題) 削除/引用 No.2214-6 - 2010/03/13 (土) 18:59:47 - fish 以前同じ現象があり、しらべたところクロスコンタミでした。 genotypeした方が良いと思います。

(無題) 削除/引用 No.2214-5 - 2010/03/12 (金) 12:29:32 - c 組織培養学会のホームページに質問箱があります。培養細胞の実験のことなどについて専門家の先生方が回答してくれます。必要ならば細胞の画像添付も可能です。一度聞いてみればどうでしょう。http://jtca.umin.jp/

(無題) 削除/引用 No.2214-4 - 2010/03/12 (金) 12:17:50 - heimlich 類子宮内膜癌細胞株であるIshikawa cellは継代数が１０を超えると性格がかわるということが知られております。 なので、がん細胞株では特に違和感はないと思います。 あと、iPS細胞を樹立した際の確認に、それがもとのfibroblastと同一であるという証明にSTR-PCRという手法を使っていたと思います。詳細を知らないのですが、同様に証明に使えるのではないかと思いました。詳しい方にお尋ねになられるのも一つかと思います。

(無題) 削除/引用 No.2214-3 - 2010/03/12 (金) 09:28:20 - qq >１−１５代までと１６−１４０代の継代数では細胞の性質がかなり異なって １代の細胞がどのようなものかで異なりますが、１−１５代までは、ガン組織にいるガンガンのガン細胞とそこそこの不死化細胞と正常細胞のヘテロな細胞集団からなっていたのではないでしょうか？ 継代を重ねるにしたがって、正常細胞の老化により、不死化細胞だけが残り、競争的に極悪ガン細胞だけになっていくとすると、１６−１４０代では性質が変わっているのはあたり前のような気もしますが、如何がでしょう。 ガンの専門でないので素人意見ですが、15代までをガン細胞と呼ぶことに少し違和感を感じます。

(無題) 削除/引用 No.2214-2 - 2010/03/11 (木) 22:41:30 - c 継代中に起きた自然突然変異にようなもので集団がしだいにヘテロになりその中で特に増殖の早いクローンがドミナントになったのかなあとおもいました。HeLa細胞など汎用されている株細胞でもラボにより形態がかなり違う事があります。クロスコンタミが不安ならアガロース電気泳動してアイソザイムパタンみるなど、よく行われる簡便なチェック方法があると思います。いずれにせよ、心配ならば、ちょっと手間かかりますが、限界希釈やクローニングリングを使って再クローニングすればよいとおもいます。

クロスコンタミネーション 削除/引用 No.2214-1 - 2010/03/11 (木) 21:50:59 - gentoku 現在大学院生でヒト腫瘍から初代培養を行っています。何とか樹立できたんですが、１−１５代までと１６−１４０代の継代数では細胞の性質がかなり異なっており、異常な増殖スピードを示すようになりました。また発現する蛋白もかなり異なっています。樹立報告をする直前まできているのですが、教授より『まさかコンタミしていないよな？』といわれ困っています。というのは同じ時期にグリオブラストーマの細胞株を培養していたため、あり得ないとは思っていますが完全には否定できないのも事実です。何かよい方法はありますか？

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