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角膜からのRNA抽出 トピック削除
No.2213-TOPIC - 2010/03/11 (木) 20:46:23 - POM
現在、実験動物の角膜からRNA抽出をしております。材料は角膜全層(1サンプルにつき10-20mg)で、方法はTRIzolを用いて、エッペンチューブ内でエッペンチューブ用の乳棒を使ってホモジナイズし、仕様書通りに抽出、DNAse処理後に吸光度ナノドロップで測定しています。今のとこと、とれるRNAはせいぜい5ugで、少ないときは1-2ugです。もし、このトピックを読まれた方で角膜からRNA抽出されている人がいたら、どの程度採取できるかを参考までに伺いたいのですが、どうでしょうか。よろしくお願いします。
 
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(無題) 削除/引用
No.2213-2 - 2010/03/12 (金) 08:13:31 - himawari
学生の頃(BSEが問題になる直前)、bovineとpigの角膜からRNAを抽出したことがありますが、POMさんと同じくらいの収率でした。
液体窒素で凍結させた後、乳鉢で粉々にしてTRIZOLに溶解です。
sample 10mgから 5〜10ugといったところでしょうか。

角膜からのRNA抽出 削除/引用
No.2213-1 - 2010/03/11 (木) 20:46:23 - POM
現在、実験動物の角膜からRNA抽出をしております。材料は角膜全層(1サンプルにつき10-20mg)で、方法はTRIzolを用いて、エッペンチューブ内でエッペンチューブ用の乳棒を使ってホモジナイズし、仕様書通りに抽出、DNAse処理後に吸光度ナノドロップで測定しています。今のとこと、とれるRNAはせいぜい5ugで、少ないときは1-2ugです。もし、このトピックを読まれた方で角膜からRNA抽出されている人がいたら、どの程度採取できるかを参考までに伺いたいのですが、どうでしょうか。よろしくお願いします。

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