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HRP標識二次抗体 Whole or Fragment? トピック削除
No.2208-TOPIC - 2010/03/11 (木) 08:42:22 - hot motto
いつも勉強させていただいております。
今回WBのanti-mouse IgGに対する二次抗体の購入の考えておりまして、それに関して質問させていただけたらと思います。

GEなどのカタログを見ていましたら、二次抗体でも
「Anti-Mouse IgG, HRP-Linked Whole Ab Sheep」
「Anti-Mouse IgG, HRP-Linked F(ab’)2 Fragment Sheep」
という2種類があります。
http://www.gelifesciences.co.jp/catalog/0428.asp

どちらもmouse IgGに対してのものですが、HRP標識された「Whole Ab」と「F(ab')2 Fragment」での使用上の違いとはなんでしょうか?
一次抗体に対する反応性などが異なるのでしょうか?

WBもプロトコールに沿ってやる程度でしたので、もしご存知の方いらっしゃいましたらご教授いただけたらと思います。
よろしくお願い致します。
 
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(無題) 解決済み 削除/引用
No.2208-3 - 2010/03/17 (水) 08:02:55 - hot+motto
>APさま
書き込み遅くなりまして申し訳ありません。
ご返答ありがとうございました。

特に免疫染色は考えていないので、Wholeの抗体を選択したいと思います。
ありがとうございました。

(無題) 削除/引用
No.2208-2 - 2010/03/11 (木) 11:58:33 - AP
F(ab')2あるいはFabのメリットは、一つにはwholeより分子量とかファンデルワールス体積を小さく抑えることができること、そのため浸透性が良くなること、もう一つは、Fc領域を介した抗原抗体反応以外の親和性(Fcレセプターなどある種のタンパク質に対してとか)や非特異的吸着を排除できることでしょう。
これらのメリットが大いに生かされるのは免疫染色です。おなじ二次抗体を免疫染色と共用するということを考えていなくて、Westernで使うだけならWholeでいいでしょう。もちろんF(ab')2でもわるいことはないですが(Fabは結合係数が低くなるので特別な理由がなければ使いません)、コストパフォーマンスも考慮して決めてください。

HRP標識二次抗体 Whole or Fragment? 削除/引用
No.2208-1 - 2010/03/11 (木) 08:42:22 - hot motto
いつも勉強させていただいております。
今回WBのanti-mouse IgGに対する二次抗体の購入の考えておりまして、それに関して質問させていただけたらと思います。

GEなどのカタログを見ていましたら、二次抗体でも
「Anti-Mouse IgG, HRP-Linked Whole Ab Sheep」
「Anti-Mouse IgG, HRP-Linked F(ab’)2 Fragment Sheep」
という2種類があります。
http://www.gelifesciences.co.jp/catalog/0428.asp

どちらもmouse IgGに対してのものですが、HRP標識された「Whole Ab」と「F(ab')2 Fragment」での使用上の違いとはなんでしょうか?
一次抗体に対する反応性などが異なるのでしょうか?

WBもプロトコールに沿ってやる程度でしたので、もしご存知の方いらっしゃいましたらご教授いただけたらと思います。
よろしくお願い致します。

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