Bio Technical フォーラム

  • バイオ関連の実験をする上での、試薬、機器、プロトコールなどの情報交換の場です。
  • 質問に対して解答できる方は是非、書き込んで下さい。
  • このフォーラムにふさわしくないと管理人が判断した投稿は予告なく削除します。

トピック一覧 | 研究留学ネットに戻る

最新のフォーラム | このフォーラム | ひとつ前のフォーラム(readのみ)

このスレッドをはてなブックマークに追加このスレッドをはてなブックマークに追加

100kbはloxpで切り出される? トピック削除
No.2155-TOPIC - 2010/03/02 (火) 12:49:10 - cre
BAC DNAを動物細胞に導入して安定株を取ろうと思っています。
使用するBACクローンはpBACe3.6がバックボーンになっています。

pBACCe3.6 Vector をバックポーンとするBACクローンの場合、インサート(150〜200kb)の両サイドにloxp配列が存在します。

このBACクローンをPI−SceIで直鎖状にして動物細胞のゲノムに導入すると、loxp配列がインサートを挟んだままの状態で導入されると思います。

この場合、その細胞でCre-リコンビナーゼを発現すると、導入したクローンのインサートは切り出されてしまうのでしょうか?

loxpで挟んだ領域が100kbや200kbなど、とても長いものでも切り出されるのでしょうか?

挟む領域の長さは関係ないのでしょうか?

どなたか教えて頂けると助かります。
よろしくお願い致します。
 
- このトピックにメッセージを投稿する -



3件 ( 1 〜 3 )  前 | 次  1/ 1. /1


(無題) 解決済み 削除/引用
No.2155-3 - 2010/03/04 (木) 15:48:57 - cre
お返事ありがとうございます。
スッキリしました。

(無題) 削除/引用
No.2155-2 - 2010/03/02 (火) 13:53:34 - 通りがかり
メガベースの欠失にも使われるくらいですから、100kb は余裕ですよ。

100kbはloxpで切り出される? 削除/引用
No.2155-1 - 2010/03/02 (火) 12:49:10 - cre
BAC DNAを動物細胞に導入して安定株を取ろうと思っています。
使用するBACクローンはpBACe3.6がバックボーンになっています。

pBACCe3.6 Vector をバックポーンとするBACクローンの場合、インサート(150〜200kb)の両サイドにloxp配列が存在します。

このBACクローンをPI−SceIで直鎖状にして動物細胞のゲノムに導入すると、loxp配列がインサートを挟んだままの状態で導入されると思います。

この場合、その細胞でCre-リコンビナーゼを発現すると、導入したクローンのインサートは切り出されてしまうのでしょうか?

loxpで挟んだ領域が100kbや200kbなど、とても長いものでも切り出されるのでしょうか?

挟む領域の長さは関係ないのでしょうか?

どなたか教えて頂けると助かります。
よろしくお願い致します。

3件 ( 1 〜 3 )  前 | 次  1/ 1. /1


パスワードを入力してチェックした記事を チェックした記事を