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おすすめ 削除/引用 No.2133-2 - 2010/03/07 (日) 23:09:00 - take http://www.brc.riken.jp/lab/dna/rvd/SOP/Adv/adenovirus3.pdf このまにゅあるがお勧め。 ウイルスが一個の細胞に一匹入ってバーストするのに4日はかかります。 限界のところでは、ウェル全体に１匹しかウイルスがいませんので、 ウェル全体がバーストするのは、その１匹ではなく、それが増えて 2回目の感染が起きてから以降なので、5日目では限界のところは バーストしません。 一方、濃いところではウェルの全ての細胞で感染が成立していれば 5日目ではCPE がみられると思います。 精製過程で濃度が高すぎると、ウイルス同士がアグリゲートして 感染効率が下がります。 ご注意を。

アデノウイルスのタイター測定 削除/引用 No.2133-1 - 2010/02/24 (水) 13:22:33 - 初心者 アデノウイルスのタイターをTCID50法で測定しようとしています。 アデノウイルスは10cm dish 3枚のHEK293細胞に感染し、 5日後(ほぼ全てがCPEを起こしていました。) freeze and thaw にてウイルスを回収、 Sartorius のVivapure 20で精製し、1 ml の濃縮液として調製しました。 10^3〜10^10 までのウイルス希釈液を調製し、TCID50法にてタイターを測定しようとしています。 現在5日目なのですが、10^3のウェルでもCPEが観察されていませんが、 たとえば10^10 PFU/ml 以上の高タイターのウイルスだと、10^3倍希釈液にして感染させた場合、大体何日目ぐらいにCPEが観察されるものなのでしょうか？ 10 cm dish で感染させ、CPEを起こしたHEK293を500 μl のPBSに懸濁し、 Freeze and thaw でウイルスを回収して、全量を次の10 cm dish のHEK293に感染させた場合は、2日目にはCPEが見られていました。

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