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ドットブロットとELISA トピック削除
No.2116-TOPIC - 2010/02/19 (金) 22:49:19 - 初心者
モノクローナル抗体を作製しようとしているものです。

現在、陽性株を検出するためにドットブロット法を用いているのですが、ELISA法でもスクリーニングができることを知りました。そこで、ドットブロット法とELISA法によるスクリーニングの長所と短所を教えて下さい。よろしくお願いします(__)
 
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(無題) 削除/引用
No.2116-3 - 2010/02/24 (水) 11:59:03 - 初心者
返信が遅くなってすみません。

今使っている、ドットブロットの機器はATTOのAE-6190というものです。

将来的に、組織染色などにも用いる予定です。

しかし、ブロットさんの言う通り大量に組織染色をする時間はないため、まずははやくモノクローナル抗体を確立したいのですが、その場合、ドットブロットよりもELISAの方が短期間でできるのではないかと考えているのですが、どうなのでしょうか?

(無題) 削除/引用
No.2116-2 - 2010/02/19 (金) 23:44:40 - ブロット
逆にお聞きしてもよろしいでしょうか?

私はELISAで大規模なスクリーニングを行った後、dot blotでの2段階目のスクリーニングを行おうと考えております。

ですが、中々dot plotがworkせずにいます。

詳しくはhttp://www.kenkyuu.net/cgi-biotech3/biotechforum.cgi?mode=view;Code=2113
ここでトピを立てておりますのでアドバイスいただけますと幸いです。


さて、初心者さんの質問に対してですが、
そのモノクロを将来的に何に用いたいのかでスクリーニング方法は変えなければなりません。

将来、免疫組織化学で用いたいのであれば、やはり組織で行わなければなりません。

しかし大量に組織染色なんてしていたら労力が馬鹿になりません。

そこで簡便にELISAやIFといったようなハイスループットでのスクリーニングを行うというわけです。

そこでpositive cloneが得られれば、本番で組織が同じように染まるか、、でクローンの絞り込みを行えば良いでしょう。

もちろん、ELISAで反応しないかたといっても、組織染色には使えるクローンは必ず無いとは言い切れませんのでね。


私の方から質問よろしいでしょうか?

Dot plotの機器は何を使用されておりますでしょうか?
もしよろしければ、メーカー名やカタログ番号も併せて教えていただけないでしょうか?
宜しくお願いいたします。

ドットブロットとELISA 削除/引用
No.2116-1 - 2010/02/19 (金) 22:49:19 - 初心者
モノクローナル抗体を作製しようとしているものです。

現在、陽性株を検出するためにドットブロット法を用いているのですが、ELISA法でもスクリーニングができることを知りました。そこで、ドットブロット法とELISA法によるスクリーニングの長所と短所を教えて下さい。よろしくお願いします(__)

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