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ウエスタンに使うブロッキング用ミルク トピック削除
No.2103-TOPIC - 2010/02/16 (火) 22:50:50 - 今浦島太郎状態です
 ウエスタンブロットのブロッキングに使うミルクは皆さん、どこのを使っているでしょうか?
 やっと7年ぶりに帰国して、ブロッキング用にスーパーへnon fat dry milkを買いに行ったら、昔使っていた雪印製品がありませんでした。数軒巡ったのですが、森永のしか売ってなく、焦りました。恥ずかしながら、時代が変わった事を実感中です。
 
 BSAではなくミルクでよい結果が出ていたので、日本でもミルクを使おうと思ってます。皆さんがどうされているか、お教え頂けるでしょうか。森永をお使いの方、おられますか?それとも、試薬メーカーのをお使いでしょうか。

 ちなみに、在米時代はStop and Shopのを使ってよい結果がでてました。

 
 
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No.2103-17 - 2010/02/19 (金) 21:22:50 - c
脱脂とリン酸化の関連は今日始めて聞きました。脱脂の過程での処理によりカゼインのセリン残基の脱リン酸化が起きるということなのでしょうか。ヒスチジン残基のリン酸化は酸に不安定と習いましたがそういうようなことなのでしょうか。

ビタミンの実験の件での余計なものというのはたぶんビオチンですね。検出系がアビジンービオチン法のときはBSAを使うように注意書きがあるから。

(無題) 削除/引用
No.2103-16 - 2010/02/19 (金) 16:17:52 - skaz

> カゼインはリン酸化されます。そのためスキムミルクでのブロッキングはリン酸化を見る実験ではバックグラウンドをあげる可能性があると聞いてました。
> それと脱脂が関係あるのだとは・・・。
>
> アメリカでも日本でも、スキムミルクにビタミンを添加してみたりと実験には余計なもの(?)が含まれがちなので、そういったものが入っていないものを選ぶようにと薦められました。

私もカゼインだけバックグラウンドに関係すると思っていましたが、影響するのはカゼインだけじゃないのでしょうね。
そういう理由で、試薬会社が売っている高いスキムミルクはやっぱり良い、とメーカーさんが言ってしましたが、実際のところ私は違いを感じたことはありません。
微妙な(?)ウエスタンブロットで影響する程度だとは思います。が、大事な実験の時はそれでも気にしてしまいそうです。

(無題) 削除/引用
No.2103-15 - 2010/02/19 (金) 15:39:49 - Kanata
> アメリカの脱脂粉乳は日本のに比べて脱脂の具合が強い(しっかり脱脂されている)
> のだそうです。
> メーカーさんによると、リン酸化などを見るときに、データシートでスキムミルクを
> 推奨しているのに、日本のスキムミルクじゃだめな時があるのはこういうことだそうです。


カゼインはリン酸化されます。そのためスキムミルクでのブロッキングはリン酸化を見る実験ではバックグラウンドをあげる可能性があると聞いてました。
それと脱脂が関係あるのだとは・・・。

アメリカでも日本でも、スキムミルクにビタミンを添加してみたりと実験には余計なもの(?)が含まれがちなので、そういったものが入っていないものを選ぶようにと薦められました。
 個人的には日米のスキムミルクでの違いはわからないレベルの実験でした。

(無題) 削除/引用
No.2103-14 - 2010/02/19 (金) 11:39:45 - skaz
少し話がそれてしまうかもしれませんが・・・

メーカーさんに聞いて自分で確かめたわけではないのですが、聞くところによると
アメリカの脱脂粉乳は日本のに比べて脱脂の具合が強い(しっかり脱脂されている)
のだそうです。
アメリカと日本の脱脂粉乳でもし差が出るとしたら、そのあたりが原因かもしれません。

メーカーさんによると、リン酸化などを見るときに、データシートでスキムミルクを
推奨しているのに、日本のスキムミルクじゃだめな時があるのはこういうことだそうです。

(無題) 削除/引用
No.2103-13 - 2010/02/18 (木) 21:23:54 - c
気のせいかもしれないですが試薬のスキムミルクよりもスーパーで売ってるスキムミルクのほうが出来上がりがきれいな感じがしたので、研究室の人はみんな試薬のスキムミルクを使ってますが私はずっと近所のスーパーで200円くらいのを買ってます。最強です。メーカーとかはそのときの気分で変えてますが気がつくようなはないです。アメリカ行った事ないのでスキムミルクUSAとうちの近所のスーパーのスキムミルクとどっちが強いかわかりません。別にどうでもいいですが。

(無題) 削除/引用
No.2103-12 - 2010/02/18 (木) 12:06:31 - パーマノックス
>[Re:11] パノーマックスさんは書きました :
> http://www.toyobo.co.jp/seihin/xr/lifescience/products/product/koutai/archives/2008/04/pvdf_blocking_reagent_for_can.html
>
> http://roche-biochem.jp/catalog/index.php/product_3.7.4.16.1.1.html
>
> これ、ググッて5秒で見つかった。
> ちゃんと調べようね。
これ、私じゃないですよ。質問の主旨を理解していないどころか微妙にHN間違えてるし。笑

このフォーラムはたまに人のHN騙る人がいるので気にしないでください。

>[Re:10] 774さんは書きました :
> 自分で調べたら?
これもおそらく本物の774さんではないでしょう。

私は研究所の購買部で買えるものを使っています。
長年日本でWBやってるけどそんなにメーカーによって変わるかなぁ?
という感じです。横レスになるかもしれないですけど、
逆にメーカーで違いがあった!って言う具体例どなたか知りませんか?

(無題) 削除/引用
No.2103-11 - 2010/02/17 (水) 12:43:28 - パノーマックス
http://www.toyobo.co.jp/seihin/xr/lifescience/products/product/koutai/archives/2008/04/pvdf_blocking_reagent_for_can.html

http://roche-biochem.jp/catalog/index.php/product_3.7.4.16.1.1.html

これ、ググッて5秒で見つかった。
ちゃんと調べようね。

(無題) 削除/引用
No.2103-10 - 2010/02/17 (水) 12:20:35 - 774
自分で調べたら?

(無題) 削除/引用
No.2103-9 - 2010/02/17 (水) 10:27:23 - み
まさしく森永商品を使用しています。
何の問題もありません 笑

(無題) 削除/引用
No.2103-8 - 2010/02/17 (水) 10:15:56 - 千夏
>ナカライのスキムミルク
スキムミルクに関して言えば雪印が格上!!(笑)

(無題) 削除/引用
No.2103-7 - 2010/02/17 (水) 08:51:44 - 今浦島太郎状態です
 さっそく情報を頂き、ありがとうございました。
 なるほど、通販と言う手がありましたね。イオンはまだ行ってなかったので、のぞいてみます。
 
 スキムミルクダイエットが流行ってるってことも知りませんでした。日本人てダイエットする必要あるのかな?と思うくらい、ふくよかな方を見かける率は低いですし、女性はむしろ皆さん細めに見えます。

 日本の食事は美味しくて、毎日ハッピーです。皆さん、情報をありがとうございました!

 

(無題) 削除/引用
No.2103-6 - 2010/02/17 (水) 08:28:20 - みい
ウチはナカライのスキムミルクを買っています。
もしかして、これって凄く贅沢なことだったりしますか?

(無題) 削除/引用
No.2103-5 - 2010/02/16 (火) 23:20:28 - とと
>業者さんにお願いして持ってきて貰ってるので、

税金の無駄と言われそうですね
うちは近所のイオンに買い出しに行きます。

(無題) 削除/引用
No.2103-4 - 2010/02/16 (火) 23:14:31 - ぶん
うちは雪印使ってます。
業者さんにお願いして持ってきて貰ってるので、直接買ってる訳じゃないんですが。
今、スキムミルクダイエットが流行ってるらしいので品薄らしいです。
ネットで調べると売ってましたよ

http://store.shopping.yahoo.co.jp/tokubaiya/44240.html

450g 557円

(無題) 削除/引用
No.2103-3 - 2010/02/16 (火) 23:10:16 - とと
試しに森永の使ってみたらいいんじゃないでしょうか

せいぜいリスクは300円程度でしょうし

ウエスタンに使うブロッキング用ミルク 削除/引用
No.2103-1 - 2010/02/16 (火) 22:50:50 - 今浦島太郎状態です
 ウエスタンブロットのブロッキングに使うミルクは皆さん、どこのを使っているでしょうか?
 やっと7年ぶりに帰国して、ブロッキング用にスーパーへnon fat dry milkを買いに行ったら、昔使っていた雪印製品がありませんでした。数軒巡ったのですが、森永のしか売ってなく、焦りました。恥ずかしながら、時代が変わった事を実感中です。
 
 BSAではなくミルクでよい結果が出ていたので、日本でもミルクを使おうと思ってます。皆さんがどうされているか、お教え頂けるでしょうか。森永をお使いの方、おられますか?それとも、試薬メーカーのをお使いでしょうか。

 ちなみに、在米時代はStop and Shopのを使ってよい結果がでてました。

 

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