その細胞は使ったことがありませんが、
プロトコルが前と同じであれば、プロトコルに書かれている部分には問題が無いのだと思います。
1.凍結細胞の保存状態が悪くて、細胞が既に死んでいる
これだとどうしようもありません。
保存条件が適切である記録はありますか?
他の場所に保存していたストックはありますか?
2.ウシ血清のロットが悪い
ウシ血清のロットが最近変わりませんでしたか?
3.インキュベーターが壊れていて、CO2濃度がおかしい
同じインキュベーターに入れているほかの細胞は大丈夫ですか?
フェノールレッドの色はおかしくありませんか?
4.MEMの調整を間違えている
調整時のノートを確認しましたか?
他の細胞を撒いてみれば分かるかもしれません。
などを疑ってみてはいかがでしょうか。
個人的には10分の遠心はかけすぎだと思いますが、
その遠心の前に死細胞が多いのですから、そこは問題ではないのでしょう。 |
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