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(無題) 削除/引用 No.2039-6 - 2010/02/05 (金) 18:13:38 - RI 回答していただいた方、ありがとうございました。 実験を失敗したくない気持ちと試薬等を節約したい気持ちとで揺れていましたが、決断しました。 〜さんのおっしゃるように、トランスファー面を外側にしてハイブリバッグに2枚のメンブレンを入れ、ハイブリします。

(無題) 削除/引用 No.2039-5 - 2010/02/04 (木) 22:09:51 - にや 2-20枚くらいを一つのバックでサザンしたことあります。 （FISH後にゲノム上の位置を調べる実験等） 50-100mlのハイブリ液でやったように記憶してます。 サイズの情報が欲しいだけだったので問題はありませんでした。 ただバンドの濃さにムラがでたり、汚れが少し多かった気がします。 定量が必要な実験の時は2枚／1バックでやってました。 私は幸運にもバンドが移った経験はありません。 たぶんメンプレンンの種類や固定や洗いの条件などによる違いではないかと思います。 （主にHybondN+でストラタクロスリンカーで両面焼きしてました）

(無題) 削除/引用 No.2039-4 - 2010/02/04 (木) 20:32:04 - Pumpkin 私もDSCさんと全く同じ経験を持ってます。プラークハイブリだったら、1次スクリーニングで15cmを24枚まで入れてやったことあります。大丈夫です。 が、サザンは１枚しかやったことないです。しっかり固定されていれば大丈夫なはずですが、それでも乗り移っているわけではないんでしょうけど、汚くなることがあったので、それ以来は面倒でも1枚づつパックしてます。 RIからケミカルに変わった今も、その習慣でやってます。

(無題) 削除/引用 No.2039-3 - 2010/02/04 (木) 19:04:39 - DSC プラハイならバッグ中で20枚重ねても問題ありませんでした。 が、サザンでは、たった2枚でも片側のメンブレンの強いシグナルが もう1枚に移って消えなかったことがあります。 それ以来、1つのバッグでもメンブレンどうしが重ならないように シーラーで仕切りを入れたりしています。 〜さんのようにトランスファー面どうしが向かい合わせにならないようにすればよかったのかも。

(無題) 削除/引用 No.2039-2 - 2010/02/04 (木) 17:05:58 - ~ ナイロンメンブレンでしたが、私がやったのはハイブリバッグに2枚まででした。 (トランスファーした面をそれぞれ外側にしていました) ノーザンで、3枚入れていた人がいたと記憶しています。 コロハイをしていたチームはハイブリ液をタッパーに入れて、10枚以上やっていました。

一度にメンブレンは何枚までハイブリできますか？ 削除/引用 No.2039-1 - 2010/02/04 (木) 16:15:01 - RI RIでサザンを行った経験のある方にお尋ねします。 ハイブリバック1枚で複数のメンブレン（ニトロセルロース）をハイブリすることは可能でしょうか？ もし可能だった場合、最大何枚まで経験がありますか？

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