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(無題) 削除/引用 No.2009-2 - 2010/02/16 (火) 19:45:54 - ＊ ELISAでOPDを基質に用いたときは490nmで測定します。 450nmで測定するのは、TMBを用いたときです。 感度はOPDとTMBが優れています。TMBは有毒物質を含まないし、液体で安定ということなので、私はTMBを使用しています。

ファージELISA 削除/引用 No.2009-1 - 2010/02/01 (月) 16:52:57 - M13 あるターゲットに対して、M13ファージライブラリーからパニングを行い、特異的なファージを溶出してきました。 現在、それらのファージを単離精製し、各ファージクローンに関して、 ELISAでターゲットに結合するかを確認しています。 ELISAでは検出抗体としてはHRP標識 anti M13 antibody、基質にはOPDを用いて検出しています。 しかし450 nmで吸光度を測定しても、最大でも0.2弱ぐらいの値しか出ません。 論文ではよくOPDではなく、ABTSが用いられていますが、ABTSの方が検出度が高いのでしょうか？ 値が低いのは、反応させるファージの量（現在10^11 pfu反応させています）やアフィニティーに問題がある可能性もありますが・・・ 初めて行う実験系でなかなかうまくいっていません。 みなさんはどのようにやられていますか？ ぜひみなさんのご意見をお聞かせ下さい。

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