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phytopureを用いたRNA抽出 トピック削除
No.2000-TOPIC - 2010/01/29 (金) 17:35:53 - とち
いつもお世話になっています。

イチゴ果実および葉からのRNA抽出について検討しています。
試料100mgに対し、TAKARAのFruits mateを1mlで前処理し、ナカライのセパゾールで抽出していますが230nmに吸収が見られます。これは多糖、またはポリフェノール類ではないかと考えています。その後、RNeazyのクリーンアップも行いましたが、RNAの吸光が見られなくなってしまいました。

そこで、多糖を除去するResinをもつDNA抽出キットのphytopureをRNA抽出に転用できないか考えています。通常のプロトコルに沿った抽出物にDNase処理を施せばRNAのみを得られるのでしょうか?

他、効率的な方法をご存じの方がいらっしゃいましたら、ご教授いただきたと思います。

よろしくお願いいたします。
 
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(無題) 削除/引用
No.2000-2 - 2010/01/29 (金) 18:34:57 - Pumpkin
RNAと多糖って結構問題になりますね。
ttp://www.kenkyuu.net/cgi-biotech2/biotechforum.cgi?mode=view;start=1;Code=784
ttp://www.kenkyuu.net/cgi-biotech2/biotechforum.cgi?mode=view;start=1;Code=1715
ttp://www.kenkyuu.net/cgi-biotech2/biotechforum.cgi?mode=view;start=2;Code=1997

その他にもあります。過去フォーラムを検索してみてください。

phytopureを用いたRNA抽出 削除/引用
No.2000-1 - 2010/01/29 (金) 17:35:53 - とち
いつもお世話になっています。

イチゴ果実および葉からのRNA抽出について検討しています。
試料100mgに対し、TAKARAのFruits mateを1mlで前処理し、ナカライのセパゾールで抽出していますが230nmに吸収が見られます。これは多糖、またはポリフェノール類ではないかと考えています。その後、RNeazyのクリーンアップも行いましたが、RNAの吸光が見られなくなってしまいました。

そこで、多糖を除去するResinをもつDNA抽出キットのphytopureをRNA抽出に転用できないか考えています。通常のプロトコルに沿った抽出物にDNase処理を施せばRNAのみを得られるのでしょうか?

他、効率的な方法をご存じの方がいらっしゃいましたら、ご教授いただきたと思います。

よろしくお願いいたします。

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