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(無題) 削除/引用 No.1993-4 - 2010/01/29 (金) 14:51:37 - CJ 塩、酸処理は組織化学的な都合なのでしょうか？だとしたら、潅流固定、薄切、スライドグラス貼り付け、後固定の後に処理するわけには行かないのでしょうか？（それだったらかなり楽でしょう） もしそういう手が使えないなら、処理した肉片をゼラチンで抱埋するという手があります。 氷晶防止処置した肉片を１０％ゼラチン/20%sucroseで数時間（固まらない温度にする、３７度など）、その後２０％ゼラチン/20%sucroseで数時間入れることでゼラチンと組織をなじませます。この後にこれを型に流し込んで固めます。最後にこれを0.2%グルタールアルデヒド（パラホルムでも良いかもしれません）で固定します。このゼラチンのブロックを薄切すれば良いわけです。ゼラチン付の切片は浮遊法で組織化学を行うこともできますし、スライドグラスに貼り付けた場合も煮た肉片の接着力が悪かったとしても、ゼラチンの接着力でスライドグラスに保持されることが期待されます。

(無題) 削除/引用 No.1993-3 - 2010/01/29 (金) 13:47:16 - ゴンタ 切片貼り付け後、すぐに（乾燥する段階で）剥がれてきてしまうため固定処理まで辿り着くことが出来ません。 切片を貼り付けた（というより載せた）直後に、固定液を切片の上に垂らしても、やはりダメでした。 先に固定した後に、PBSなどで洗うと良いでしょうか？ ちなみに、先に固定する場合ですが 塩＋酸で処理した組織の状態を観察したいという目的に対して 塩＋酸の溶液に４％PFAとなるようにしたもので固定すればよいでしょうか？ 通常の4%PFA（／PBSなど）で固定すると、固定される前に組織の状態が塩＋酸で処理する前の状態に戻ってしまうのではないかと思うので。。。

(無題) 削除/引用 No.1993-2 - 2010/01/29 (金) 08:51:45 - CJ えぐい処理をするとはがれやすくなりますよね。 まず、ＭＡＳコートスライド以外は使い物にならないのではないかと思います。 切片貼り付け後に固定処理はしていますか？これらのスライドは固定可能です。

塩＋酸処理組織がスライドガラスから剥がれる 削除/引用 No.1993-1 - 2010/01/28 (木) 18:07:50 - ゴンタ 筋肉組織（肉片）を塩と酸で処理した時の、組織の様子を観察したいと思っています。 塩（NaCl）3.4%、ｐHは4程度で加熱処理した後に、そのまま凍結切片を作っているのですが、APSやMASコートなどのスライドガラスを使っても、切片を乾燥すると必ずと言って良いほど剥がれてしまいます。 pHだけで処理した場合は、問題なく接着します。 恐らく、一般的にはマイナスに電荷している組織が、生理食塩水以上の塩を入れることによって、電荷を帯びない（またはプラスに帯電）ため、正電荷のコーティングスライドグラスからは剥がれやすいのではないかと思っています。 このようなとき、どうしたら良いか サンプルの処理やスライドグラスのコーティングなどについてご指導ください。

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