Bio Technical フォーラム

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菌体外酵素のタンパク濃度測定 トピック削除
No.1926-TOPIC - 2010/01/17 (日) 01:47:24 - もふもふ
YM培地に５%サラダ油を入れて培養し菌体外酵素を作っているのですが、培養中の時間でのタンパク濃度をBCA法で測定しようと思っています。
しかし培養液を遠心し上層を測定しようとすると培地の影響で測定できません。アセトン沈殿などの濃縮を考えましたが毎回すると時間と容量がとんでもなくかかります。
何かいい方法はないでしょうか？
　
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(無題) 削除/引用
No.1926-2 - 2010/01/17 (日) 09:06:32 - おお
ゲル濾過のスピンカラムで低分子をカットする手は
取れないですか(G50はちょっと大きいのでG25くらいで)、、、何が邪魔しているのかによりますけど。

同様の考えだとマイクロダイアリシスかなあ。
スクリューキャップのエッペンのトップに
透析まく張ったやつとかだと手軽だと思います。
外液とのしんとう圧がそれなりに違うと
ばらつきの原因になるかもしれませんが、、、

菌体外酵素のタンパク濃度測定 削除/引用
No.1926-1 - 2010/01/17 (日) 01:47:24 - もふもふ
YM培地に５%サラダ油を入れて培養し菌体外酵素を作っているのですが、培養中の時間でのタンパク濃度をBCA法で測定しようと思っています。
しかし培養液を遠心し上層を測定しようとすると培地の影響で測定できません。アセトン沈殿などの濃縮を考えましたが毎回すると時間と容量がとんでもなくかかります。
何かいい方法はないでしょうか？
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