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western blotting(SREBP-1c)のポジコンの作り方とおすすめの抗体 トピック削除
No.1922-TOPIC - 2010/01/16 (土) 01:39:18 - よっしー
現在SREBP1cのウェスタンブロットをしています。抗体はsanta cruzのsc-8984とabcamのab28481を使いサンプルはratの肝臓でやっています。SREBP1cはprematureとmatureフォームがあり、２つの抗体はエピトープからすれば両方検出できるはずでそれぞれの会社に問い合わせし両方同定できる事を確認しました。しかしsanta cruzの抗体はnon-specificが多く、またabcamのものは推察されるMWとつがう所にバンドを示しており、また２つの抗体で同じサイズの所にあるバンドが認められません。２つの会社のポジコンサンプルは肝臓であったり、humanのSREBP1cのタンパクでratと大きさが少し違います。
そこで２つ教えてほしいのですが
１、SREBP1cでratのprematureとmatureをみる最もおすすめの抗体。
２、私の様な状況で、どのバンドが真のSREBP1cを見ているのかを確認する為のポジコンはどのようにすれば良いか。
ご存知の方がおみえになりましたらば教えてください。
よろしくお願いいたします。
　
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(無題) 削除/引用
No.1922-2 - 2010/01/16 (土) 02:36:04 - み
絶食、高脂肪食などで脂肪合成関連酵素の発現量は変化すると予想します。

western blotting(SREBP-1c)のポジコンの作り方とおすすめの抗体 削除/引用
No.1922-1 - 2010/01/16 (土) 01:39:18 - よっしー
現在SREBP1cのウェスタンブロットをしています。抗体はsanta cruzのsc-8984とabcamのab28481を使いサンプルはratの肝臓でやっています。SREBP1cはprematureとmatureフォームがあり、２つの抗体はエピトープからすれば両方検出できるはずでそれぞれの会社に問い合わせし両方同定できる事を確認しました。しかしsanta cruzの抗体はnon-specificが多く、またabcamのものは推察されるMWとつがう所にバンドを示しており、また２つの抗体で同じサイズの所にあるバンドが認められません。２つの会社のポジコンサンプルは肝臓であったり、humanのSREBP1cのタンパクでratと大きさが少し違います。
そこで２つ教えてほしいのですが
１、SREBP1cでratのprematureとmatureをみる最もおすすめの抗体。
２、私の様な状況で、どのバンドが真のSREBP1cを見ているのかを確認する為のポジコンはどのようにすれば良いか。
ご存知の方がおみえになりましたらば教えてください。
よろしくお願いいたします。
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