Bio Technical フォーラム

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細胞膜染色 トピック削除
No.1901-TOPIC - 2010/01/13 (水) 19:36:45 - みみ
いつもお世話になっております。

初代培養細胞を用いた核酸導入実験をしたいと考えています。核酸は蛍光標識しているので、細胞膜も染めて細胞の中に核酸がある画像を撮りたいと思いまして、細胞膜染色試薬を探しています。

invitrogenのorganelle lightsで細胞膜を染めようと思ったのですが、プロトコルを見ますと試薬で処理してから1日おいてから観察すると書いてありました。
できれば染色時間が1-2時間くらいで直ぐに観察できる試薬があればよいのですが、何かお勧めの試薬はありますでしょうか?

染色実験は初心者ですので、アドバイスよろしくお願いします。
 
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No.1901-6 - 2010/01/14 (木) 10:26:47 - みみ
み、toyoさんへ

アドバイスありがとうございます。
これだと、直ぐに染色できそうですね。
試してみたいと思います。

(無題) 削除/引用
No.1901-5 - 2010/01/13 (水) 21:32:46 - toyo
うちのラボではCellMask Deepredを使っています。
http://www.invitrogen.jp/mp/h34558.shtml
普段は固定後に使っていますが、生細胞に直接かけることも
可能と書いてあるようです。

(無題) 削除/引用
No.1901-4 - 2010/01/13 (水) 21:06:36 - み
読んでみると、organelle lightsは各細胞小器官に局在することが分かっている蛋白に蛍光蛋白を付加させたものを強制発現させる手法のようです。だから1日かかる。

下記の試薬のうち使えそうなものがあるのでは:
http://www.invitrogen.jp/catalogue/molecular_probes/cell_bio_new/organella/plasma.shtml

(無題) 削除/引用
No.1901-3 - 2010/01/13 (水) 20:51:05 - みみ
ご連絡ありがとうございます。

Na-K ATPaseということは抗体で標識させるのでしょうか?
できれば固定しないで観察したいのですが・・・

(無題) 削除/引用
No.1901-2 - 2010/01/13 (水) 19:43:45 - ゆーた
Na-K ATPaseは細胞膜を染めるのに使われます。

細胞膜染色 削除/引用
No.1901-1 - 2010/01/13 (水) 19:36:45 - みみ
いつもお世話になっております。

初代培養細胞を用いた核酸導入実験をしたいと考えています。核酸は蛍光標識しているので、細胞膜も染めて細胞の中に核酸がある画像を撮りたいと思いまして、細胞膜染色試薬を探しています。

invitrogenのorganelle lightsで細胞膜を染めようと思ったのですが、プロトコルを見ますと試薬で処理してから1日おいてから観察すると書いてありました。
できれば染色時間が1-2時間くらいで直ぐに観察できる試薬があればよいのですが、何かお勧めの試薬はありますでしょうか?

染色実験は初心者ですので、アドバイスよろしくお願いします。

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