Bio Technical フォーラム

  • バイオ関連の実験をする上での、試薬、機器、プロトコールなどの情報交換の場です。
  • 質問に対して解答できる方は是非、書き込んで下さい。
  • このフォーラムにふさわしくないと管理人が判断した投稿は予告なく削除します。

トピック一覧 | 研究留学ネットに戻る

最新のフォーラム | このフォーラム | ひとつ前のフォーラム(readのみ)

このスレッドをはてなブックマークに追加このスレッドをはてなブックマークに追加

バクテリアゲノム上の複数のORFを共発現させる方法 トピック削除
No.1885-TOPIC - 2010/01/10 (日) 17:27:20 - 異分野研究者
いつも参考にさせていただいております。

トピックのとおり、バクテリアゲノム上にある、
サブユニットを形成する可能性のある
複数の連続した遺伝子を大腸菌で共発現しようと考えております。
それらの遺伝子長は、合わせて〜5kbp程度です。

まとめてPCRにかけて、適当なプラスミドにクローニングすれば
それらがサブユニット形成をする場合、大腸菌内で
複合体として発現するでしょうか?

因みにシグナルペプチドがついている遺伝子があるので、
その遺伝子については、膜貫通領域も含めて削ろうと考えています。

当方、初体験ですので、
参考HP等ご存知でしたら、ご教示お願いします。
 
- このトピックにメッセージを投稿する -



3件 ( 1 〜 3 )  前 | 次  1/ 1. /1


(無題) 削除/引用
No.1885-3 - 2010/01/13 (水) 14:21:54 - へいる
以前、異分野研究者さんが考えているようなことができないかと思い、某会社のテクニカルサービスに尋ねたことがありますが、原理上うまくいかないはずだといわれました。pETかpGEXか、どちらかの会社だったと思います。当時原理は読んで理解したように思いますが、忘れてしまいました。気になるようでしたらご自分で確認されたらどうかと思います。

(無題) 削除/引用
No.1885-2 - 2010/01/10 (日) 19:45:21 - ザンギ
出来るかもしれない。
としか回答のつけようがないですが、元の生き物が大腸菌に近い生き物で
あれば成功する期待値は大きいと思いますが、ケースバイケースなので。

最低限、対象遺伝子の全てが元の生き物ではオペロンとして転写されてる
ことが必要と思います。

バクテリアゲノム上の複数のORFを共発現させる方法 削除/引用
No.1885-1 - 2010/01/10 (日) 17:27:20 - 異分野研究者
いつも参考にさせていただいております。

トピックのとおり、バクテリアゲノム上にある、
サブユニットを形成する可能性のある
複数の連続した遺伝子を大腸菌で共発現しようと考えております。
それらの遺伝子長は、合わせて〜5kbp程度です。

まとめてPCRにかけて、適当なプラスミドにクローニングすれば
それらがサブユニット形成をする場合、大腸菌内で
複合体として発現するでしょうか?

因みにシグナルペプチドがついている遺伝子があるので、
その遺伝子については、膜貫通領域も含めて削ろうと考えています。

当方、初体験ですので、
参考HP等ご存知でしたら、ご教示お願いします。

3件 ( 1 〜 3 )  前 | 次  1/ 1. /1


パスワードを入力してチェックした記事を チェックした記事を