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細胞骨格蛋白をターゲットにしてcell sorting? トピック削除
No.187-TOPIC - 2009/03/14 (土) 02:20:39 - 実験したい
よろしくお願いいたします.

今は研究する環境には無いのですが、いつかできるようになったらやりたいと思っている仕事があります.
ところがその考えている仕事の内容を頭の中で(ぼーっと)シュミレーションしていると、「細胞を生きたまま分取、培養する」という部分をクリアしないとその先進まない事がわかりました(笑).当然、表面抗原を用いてのcell sortingと考えたのですが、分取する標的は細胞内の細胞骨格でした。ちなみにその蛋白がinteractionする表面抗原はまだ文献には出ておりません.
私の頭の中のわずかな知識では、もうここでお手上げです.
あるいはcell sorting以外に細胞骨格をターゲットとして生細胞を分取できる方法があるのでしょうか.

どなたか、何か良い知恵を授けていただけませんか.
お願いいたします.
 
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(無題) 削除/引用
No.187-6 - 2009/03/14 (土) 10:20:42 - 通りがかり
> 最終的には臨床検体の細胞からのsortingが目標です。

この場合も同じ考え方でいけますよ。
その蛋白のプロモーター領域にGFPをつなぎ、ウイルスベクター等で臨床検体の細胞に導入すれば、目的の蛋白を発現している細胞を蛍光で見分けることは可能です。

(無題) 削除/引用
No.187-5 - 2009/03/14 (土) 08:06:04 - ats
細胞種に特徴的なサイトケラチンのことですかね?
特異的で毒性が低い蛍光染色剤があれば可能かも?(存在を知りませんが)

ありがとうございます。 削除/引用
No.187-4 - 2009/03/14 (土) 04:51:03 - 実験したい
すみません.
題名だけで送信してしまいました.

>GFPなどのレポーターをノックインした細胞
なるほど。というか、GFPなどでもsortingできる事、知りませんでした.
お恥ずかしい、、、。
もし良ければもう少し詳しく教えていただければ幸いです.あるいはこのサイトに載ってるよというところがあれば教えてください.

Rさんのご指摘のように何か目印を細胞に導入できればいいのですが、最終的には臨床検体の細胞からのsortingが目標です。これについてはいかがでしょうか.

ありがとうございます。 削除/引用
No.187-3 - 2009/03/14 (土) 04:13:10 - 実験したい

ノックイン 削除/引用
No.187-2 - 2009/03/14 (土) 03:02:35 - R
GFPなどのレポーターをノックインした細胞を使えませんか??

細胞骨格蛋白をターゲットにしてcell sorting? 削除/引用
No.187-1 - 2009/03/14 (土) 02:20:39 - 実験したい
よろしくお願いいたします.

今は研究する環境には無いのですが、いつかできるようになったらやりたいと思っている仕事があります.
ところがその考えている仕事の内容を頭の中で(ぼーっと)シュミレーションしていると、「細胞を生きたまま分取、培養する」という部分をクリアしないとその先進まない事がわかりました(笑).当然、表面抗原を用いてのcell sortingと考えたのですが、分取する標的は細胞内の細胞骨格でした。ちなみにその蛋白がinteractionする表面抗原はまだ文献には出ておりません.
私の頭の中のわずかな知識では、もうここでお手上げです.
あるいはcell sorting以外に細胞骨格をターゲットとして生細胞を分取できる方法があるのでしょうか.

どなたか、何か良い知恵を授けていただけませんか.
お願いいたします.

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