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大腸菌数え方 トピック削除
No.1851-TOPIC - 2010/01/04 (月) 18:10:06 - dd
OD600=1.0の時大腸菌の1mlでの菌数はどのくらいでしょうか?

実験初心者でまず、OD600=1.0とする理由等が良くわからないので詳しく教えていただけると幸いです。
 
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No.1851-8 - 2010/01/05 (火) 14:52:08 - ザンギ
すでに書かれていますが、まとめると。

吸光度は溶液に溶けてる溶質の濃度を測定する指標で、モル吸光係数が知られて
いれば溶質のモル濃度を知ることが出来ます。
AbsはAbsorbanceの略号ですから、吸光度を測定した時に使うのが正しいです。

濁度は懸濁液中の粒子の密度を測定する時の指標ですよね。
濁度係数は粒子の形状に依存するので、菌株や培養条件によって大きさや
形が変わる大腸菌では、物理定数として濁度係数を求められません。
だから1ODの時に菌体数はどれだけか?には厳密には答えられません。
でも測定するのに便利だからよく使われてます。

で、最初の質問の回答にはならないのですが...
OD=1の時の培養液は概ねlate log-phaseあたりの増殖段階であることと、
あまり大きくは違わないのでよく使います。

という程度のことで、数字自体にあまり意味はないと僕は理解しています。

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No.1851-7 - 2010/01/05 (火) 13:03:54 - 中年
大腸菌の培養液の場合は吸収よりも散乱の寄与が大きいでしょうから、吸光度(Abs)は相応しくありません。

(無題) 削除/引用
No.1851-6 - 2010/01/05 (火) 12:47:23 - ばいや
1OD_600=8*10^8cells/ml(大腸菌の場合)の換算式
ってネットに転がっていました。

ODとAbsが実はちょっと違うのは知っていましたが、理解はしていなかったです。今でもどう違うかは理解できていませんが。

自分で単位を書くときはなるべくAbsを使ってます。ODはなんだか嫌で。さもなくば言葉で。
理解していない人の対策だったりします。
でもネットでは同じ意味で書かれていますね。

(無題) 削除/引用
No.1851-5 - 2010/01/05 (火) 11:02:56 - 中年
OD当たりの菌数は菌株によってかなり違いますよ。10倍までは違わないでしょうけど。

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No.1851-4 - 2010/01/05 (火) 10:37:23 - ザンギ
大腸菌は大きめのコロニー一個で1億匹くらいいたんじゃないかなぁ。
だから1ODで1mlが10^8ってことはないと思うんだけど。

でもcfuと細胞数では違うか。

ちなみにここで議論になってるODは、厳密には日本語で濁度と言われる
指標で吸光度とはちょっと違いますね。
本当なら濁度計で測定しないといけないものなんですが、分子生物系
のラボでわざわざ濁度計を揃えてるところは少なくて、吸光度計で
代用してるのが実情ですね。

回答にはなってませんが。

(無題) 削除/引用
No.1851-3 - 2010/01/05 (火) 09:56:03 - 芋
OD600 = 1.0の時、1mlで大腸菌だと10^8cfuぐらいだったと記憶しています。

(無題) 削除/引用
No.1851-2 - 2010/01/05 (火) 08:54:40 - ばいや
OD600=1.0とは吸光度の測定値が1.0ということです。

理由も何もありません。

ってだけだとなんなので

増殖期などは0.4-0.6くらいだったと思います。
増殖のグラフを時間系列で書いたらそうなっただけです。
記憶だけで書いているので責任は持ちません。自分で調べてみてね。

1.0が何を意味しているのか知りませんが、そのときの吸光度が何かの実験にはうってつけだったのでしょう。

菌数は知りません。

大腸菌数え方 削除/引用
No.1851-1 - 2010/01/04 (月) 18:10:06 - dd
OD600=1.0の時大腸菌の1mlでの菌数はどのくらいでしょうか?

実験初心者でまず、OD600=1.0とする理由等が良くわからないので詳しく教えていただけると幸いです。

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