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バッファー希釈でpH変動 トピック削除
No.1828-TOPIC - 2009/12/27 (日) 20:08:37 - タキ
10x PBSをpHを7.4で作製した後に、10倍希釈したところpHが7.9に
なっていました。
他にも1M Trisも10-50倍希釈するとpHが変わっています。

10xPBSは以下の組成で作っています。

NaCl:80g
KCl:2g
Na2HPO4:14.4g
KH2PO4:2.4g
約900mlで溶かした後(このときのpHは6.8)、NaOHでpH7.4に調整。

pHメーター(Beckmanφ360)は校正していますが、みたところ
電極がかなり古い様で、pHメーターは6-7年前に購入したものですが
電極はここ数年交換されていないようです。
電極が古いのが原因で、バッファーを希釈するとpHが変動するようなことが
起こるものでしょうか?

このような現象に遭われた方いませんか?
 
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(無題) 削除/引用
No.1828-7 - 2010/01/02 (土) 10:08:53 - 腸管
電極が不具合なら、pHの校正がうまくいかないと思いますよ

φ360ならついこの前まで使用していましたが、
校正した後、画面下の方にOKと表示されていれば
電極は大丈夫なはずです。

あと説明書に、電極と本体のチェックの仕方が載ってるはずですよ
試してはいかかですか???

(無題) 削除/引用
No.1828-6 - 2009/12/29 (火) 00:29:18 - モモ
私の理解では、10xPBSは希釈した時にPHが合うようになったいるので、
調製のときにいちいちPHをあわせる必要はないということです。

削除/引用
No.1828-5 - 2009/12/28 (月) 22:23:24 - タキ
みなさんありがとうございます。

恥ずかしいかぎりです。

バッファーは10倍程度の希釈ではpHは変わらないものと思っていました。
以前MES, PIPESではそうだったもので、てっきりPBS, Trisでも同じかと思い込んでました。
あれはGoodのバッファーだったからか...?

ということは、市販の10xPBSなんかも希釈したらpHを確認する必要があるということでしょうか?

(無題) 削除/引用
No.1828-4 - 2009/12/28 (月) 00:22:30 - Kanata
温度によってもpH変動するし、希釈すれば動きます。
厳密にpHをあわせたかったら、最初から50mMで作ります。

(無題) 削除/引用
No.1828-3 - 2009/12/27 (日) 21:00:13 - f
多分ここの全員遭ってると思います。

えぇっと 削除/引用
No.1828-2 - 2009/12/27 (日) 20:14:21 - ami
バッファーって希釈でpH変わるのが普通だと思ってましたが、、

バッファー希釈でpH変動 削除/引用
No.1828-1 - 2009/12/27 (日) 20:08:37 - タキ
10x PBSをpHを7.4で作製した後に、10倍希釈したところpHが7.9に
なっていました。
他にも1M Trisも10-50倍希釈するとpHが変わっています。

10xPBSは以下の組成で作っています。

NaCl:80g
KCl:2g
Na2HPO4:14.4g
KH2PO4:2.4g
約900mlで溶かした後(このときのpHは6.8)、NaOHでpH7.4に調整。

pHメーター(Beckmanφ360)は校正していますが、みたところ
電極がかなり古い様で、pHメーターは6-7年前に購入したものですが
電極はここ数年交換されていないようです。
電極が古いのが原因で、バッファーを希釈するとpHが変動するようなことが
起こるものでしょうか?

このような現象に遭われた方いませんか?

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